Development of near-field optical microscopy for hydrogen ion concentration and membrane potential using environmental sensitivity dye

使用环境敏感性染料开发氢离子浓度和膜电位的近场光学显微镜

• 批准号: 22310078
• 负责人: UMEDA Norihiro
• 金额: $ 12.65万
• 依托单位: Tokyo University of Agriculture and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22310078/
• 关键词: 近接場光学顕微鏡; 蛍光感受性色素; ミトコンドリア; pH; ネクローシス; 多光子吸収; プロトンポンプ; 蛍光色素; ｐH; フェムト秒レーザー

In this study, a dual-wavelength pH-sensitive dye was excited by two-photon absorption initiated using afemtosecond pulse laser. In addition, fluorescence from the dye was directly collected from the fluorescent point using the collection-mode probe of a scanning near-field optical microscope. By thisproposed method, a pH calibration curve was obtained from the fluorescent intensity ratio of the dyesolution, and temporal pH variations with 0.1 s time resolution following the addition of acid wereobserved. Moreover, mitochondrial activity on the basis of the pH changes was successfully observed in three different mitochondrial densities.

在这项研究中，使用Afemtsecond脉冲激光器启动的两光子吸收激发了双波长pH敏感的染料。另外，使用扫描近场光学显微镜的收集模式探针直接从荧光点收集了来自染料的荧光。通过这种规定的方法，从染料溶液的荧光强度比获得了pH校准曲线，并在添加酸后，具有0.1 s时间分辨率的时间pH变化。此外，在三种不同的线粒体密度中成功观察到了基于pH变化的线粒体活性。

项目成果

2光子励起による2波長蛍光レシオを用いた微小領域pH測定

使用双光子激发的双波长荧光比进行微区 pH 测量

• 发表时间: 2011
• 作者: 金指康明,李永波,小野島匠,岩見健太郎,太田善浩,梅田倫弘

ミトコンドリア活性評価のための膜電位観測と2 光子吸収pH 測定

膜电位观察和双光子吸收 pH 测量用于线粒体活性评估

• 发表时间: 2013
• 作者: 金指 康明;野村 雄一;李 永波;吉松 大輝;岩見 健太郎;太田 善浩;梅田 倫弘
• 通讯作者: 梅田 倫弘

蛍光レシオ近接場顕微鏡法によるミトコンドリア活性の観測

荧光比近场显微镜观察线粒体活性

• 发表时间: 2010
• 作者: Keiko Tawa;Xiaoqiang Cui;Kenji Kintaka;Junji Nishii;F. Maeda;李永波,金指康明,岩見健太郎,太田善浩,梅田倫弘
• 通讯作者: 李永波,金指康明,岩見健太郎,太田善浩,梅田倫弘

Two-photon fluorescence near-field pH measurement for mitochondria activity

双光子荧光近场 pH 测量线粒体活性

• 发表时间: 2011
• 期刊: SPIE Digital Library NanoScience + Engineering: Instrumentation, Metrology, and Standards for Nanomanufacturing, Optics, and Semiconductors V
• 作者: Y. Kanazashi;Y. Li;T. Onojima;K. Iwami;Y. Ohta;N. Umeda
• 通讯作者: N. Umeda

pH measurement for mitochondrial activity evaluation using fluorescent ratiometry by two-photon absorption

使用双光子吸收荧光比例法进行 pH 测量以评估线粒体活性

• 发表时间: 2012
• 作者: Y. Kanazashi;Y. Li;T. Onojima;K. Iwami;Y. Ohta;N. Umeda
• 通讯作者: N. Umeda