Kampo-Kinome解析によるケミカルバイオロジーの展開

通过汉方激酶组分析发展化学生物学

基本信息

批准号：
21659025
负责人：
櫻井宏明
金额：
$ 1.98万
依托单位：
University of Toyama
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

项目摘要

漢方・生薬をはじめとする天然薬物には多様な化学成分が含まれており、個々の化学成分の生物活性が複合的に薬効を規定している。その複雑さ故、活性を単一のターゲット分子に対する効果として捉えるのではなく、生体システムに対する多面的効果として把握していくことが重要であると考えられる。したがって、漢方・生薬の効果を多面的に解析する目的において、Human Kinomeを対象とした解析は、その効果をシグナル伝達の観点から統合的に理解するために極めて有効な手段であると期待される。本年度は、五味子成分のgomisin Nに焦点を絞り、そのTNF-αやTRAILシグナル伝達経路に対する効果を検討するとともに、その作用機構の解析を行った。まず、ホタルルシフェラーゼを用いたレポーター遺伝子アッセイを行ったところ、TNF-αによって誘導されたNF-kB依存的な遺伝子発現がgomisin Nによって抑制された。NF-kB活性化に関わるシグナル伝達経路に及ぼす効果を検討した結果、gomisin NがIkBαのリン酸化を起こすIkB kinase(IKK)の活性化を阻害することを見出した。次に、最近我々が見出した細胞生存シグナルであるMAPKを介したEGFR経路に対する効果を検討した結果、p38MAPKによるEGFR Ser-1046/7のリン酸化を抑制することがわかった。以上のように、Human Kinomeを対象とした解析は、個々の生薬によって異なった活性を示すことが明らかとなった。生薬の種類を広げるとともに、細胞内でのタンパク質リン酸化に対する効果(リン酸化プロテオミクス)を実施することにより、漢方・生薬の生物活性の規格化に応用できる可能性が考えられた。さらに、個々の興味深い活性についても、成分同定によるケミカルバイオロジーへの展開も期待される。

天然药物，包括中草药和草药，含有多种化学成分，单个化学成分的生物活性共同决定了其药效。由于其复杂性，重要的是要了解其活性不是对单个靶分子的影响，而是对生物系统的多方面影响。因此，为了对中草药和草药的作用进行多方面的分析，针对人类激酶组的分析有望成为从信号转导的角度全面了解其作用的极其有效的手段。今年，我们重点关注五味子成分gomisin N，研究其对TNF-α和TRAIL信号转导通路的影响，并分析其作用机制。首先，我们使用萤火虫荧光素酶进行报告基因测定，发现 gomisin N 抑制 TNF-α 诱导的 NF-kB 依赖性基因表达。通过检查对参与 NF-kB 激活的信号转导途径的影响，我们发现 gomisin N 抑制 IkB 激酶 (IKK) 的激活，从而导致 IkBα 磷酸化。接下来，我们检查了我们最近发现的细胞生存信号MAPK对EGFR通路介导的影响，发现它抑制了p38MAPK对EGFR Ser-1046/7的磷酸化。如上所述，人类激酶组分析表明，不同的草药表现出不同的活性。通过扩大草药的类型并检查它们对细胞内蛋白质磷酸化的影响（磷酸蛋白质组学），人们认为该方法可能用于标准化中草药和草药的生物活性。此外，预计个别有趣的活动将通过成分鉴定发展为化学生物学。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Kampo-Kinome解析に基づく和漢薬の生物活性情報

基于汉方激酶组分析的日药和中药的生物活性信息

DOI：
发表时间：
2009
期刊：
影响因子：
0
作者：
Uehara;T.;上原孝;上原孝;上原孝;上原孝;上原孝;Waiwut P.;Thanaketpaisarn O.;Lirdprapamongkol K.;櫻井宏明;Waiwut Pornthip.;櫻井宏明;櫻井宏明;櫻井宏明
通讯作者：
櫻井宏明

Vanillin enhances TRAIL-induced apoptosis in cancer cells through inhi bition of NF-κB activation.

Vanillin 通过抑制 NF-κB 激活增强 TRAIL 诱导的癌细胞凋亡。