Cancer pathophysiology and treatment from the perspective of dual-mode control of EGFR

EGFR双模式调控视角下的癌症病理生理与治疗

基本信息

批准号：
22H02763
负责人：
櫻井宏明
金额：
$ 11.23万
依托单位：
University of Toyama
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H02763/
关键词：
EGFR がん病態治療シグナル伝達エンドサイトーシス

项目摘要

EGFRの細胞内輸送機構について検討を行った。特に、フローサイトメーターによる細胞表面上のEGFR発現量の定量化の方法を確立した。これにより、各種阻害剤などの影響など、詳細な解析が可能となった。また、我々がデュアルモード制御と呼んでいる、定型的なリガンド結合型エンドサイトーシスとリガンド非結合型の非定型的なエンドサイトーシス機構について、どちらか一方だけのエンドサイトーシスが起こるEGFR変異体を用いて検討した。その結果、非定型的機構が起こらない変異体（非定型的制御を受けるリン酸化部位をアミノ酸置換したもの）では、低濃度EGFで強く定型的エンドサイトーシスが起こることがわかった。この実験系を用いることにより、非定型的機構を考慮に入れずに定型的機構の解析ができるようになっただけでなく、非定型的機構が起こらない条件では定型的機構が起こりやすくなっている可能性が考えられた。EGFRの非定型的エンドサイトーシスを抗体薬物複合体に応用する方法論の確立については、その基となる結果を論文として公表した。また、外部研究者との共同研究に発展し、p38活性化を起こす物質がEGFR標的の抗体薬物複合体の細胞障害活性を増強することを見出した。がん細胞の遊走におけるEphA2との協同作用について検討するため、EphA2の活性化機構の検討を行った。その結果、p38下流のMK2キナーゼを介して活性化したRSKがぐ莉緒ブラストーマの遊走に関与していることを見出した。

我们研究了 EGFR 的细胞内转运机制。特别是，我们建立了一种使用流式细胞仪定量细胞表面 EGFR 表达的方法。这使得可以详细分析各种抑制剂的效果等。此外，关于典型的配体结合的内吞机制和非配体结合的非典型内吞机制，我们将其称为双模式调节，我们研究了仅发生一种类型的内吞作用的EGFR突变体结果发现，在不发生非典型机制的突变体中(其中受到非典型调节的磷酸化位点被氨基酸取代)，在低浓度的EGF下发生强的典型内吞作用。通过使用这个实验系统，我们不仅能够在不考虑非典型机制的情况下分析典型机制，而且还发现，在非典型机制不发生的条件下，典型机制更有可能发生。。关于建立将EGFR非典型内吞作用应用于抗体药物偶联物的方法学，我们在论文中发表了基本结果。此外，我们与外部研究人员开展了合作研究，发现引起 p38 激活的物质增强了针对 EGFR 的抗体药物偶联物的细胞毒活性。为了研究EphA2在癌细胞迁移中的协同作用，我们研究了EphA2的激活机制。结果，我们发现RSK通过p38下游的MK2激酶激活，参与Rio母细胞瘤的迁移。