Cancer pathophysiology and treatment from the perspective of dual-mode control of EGFR

EGFR双模式调控视角下的癌症病理生理与治疗

基本信息

批准号：
22H02763
负责人：
櫻井宏明
金额：
$ 11.23万
依托单位：
University of Toyama
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H02763/
关键词：
EGFR がん病態治療シグナル伝達エンドサイトーシス

项目摘要

EGFRの細胞内輸送機構について検討を行った。特に、フローサイトメーターによる細胞表面上のEGFR発現量の定量化の方法を確立した。これにより、各種阻害剤などの影響など、詳細な解析が可能となった。また、我々がデュアルモード制御と呼んでいる、定型的なリガンド結合型エンドサイトーシスとリガンド非結合型の非定型的なエンドサイトーシス機構について、どちらか一方だけのエンドサイトーシスが起こるEGFR変異体を用いて検討した。その結果、非定型的機構が起こらない変異体（非定型的制御を受けるリン酸化部位をアミノ酸置換したもの）では、低濃度EGFで強く定型的エンドサイトーシスが起こることがわかった。この実験系を用いることにより、非定型的機構を考慮に入れずに定型的機構の解析ができるようになっただけでなく、非定型的機構が起こらない条件では定型的機構が起こりやすくなっている可能性が考えられた。EGFRの非定型的エンドサイトーシスを抗体薬物複合体に応用する方法論の確立については、その基となる結果を論文として公表した。また、外部研究者との共同研究に発展し、p38活性化を起こす物質がEGFR標的の抗体薬物複合体の細胞障害活性を増強することを見出した。がん細胞の遊走におけるEphA2との協同作用について検討するため、EphA2の活性化機構の検討を行った。その結果、p38下流のMK2キナーゼを介して活性化したRSKがぐ莉緒ブラストーマの遊走に関与していることを見出した。

研究了EGFR细胞内转运的机制。特别是，已经建立了一种通过流式细胞仪来量化细胞表面上EGFR表达量的方法。这使得可以详细分析各种抑制剂和其他因素的影响。我们还使用EGFR突变体使用EGFR突变体进行了典型的和非配体结合内吞作用机制，这些机制称为双模式控制机制。结果，发现没有非典型机制的突变体（在非典型控制位点被氨基酸取代）强烈形态学内吞作用是在低浓度的EGF下发生的。通过使用此实验系统，不仅可以在不考虑标准机制的情况下分析标准机制，而且还认为，在没有发生非典型机制的情况下，标准机制可能更可能发生。基本结果已在论文中发表了有关建立一种将EGFR非典型内吞作用的方法的建立，以抗体药物共轭物。此外，它已经与外部研究人员合作发展，发现激活p38的物质增强了EGFR靶向的抗体药物结合物的细胞毒性活性。为了研究以Epha2与EPHA2在癌细胞迁移中的合作效应，我们研究了EPHA2激活的机制。结果，我们发现通过p38下游激活的RSK参与了GUI Blastoma的迁移。