Investigation of the folding dynamics of proteins based on the advanced method of single molecule detection

基于先进的单分子检测方法研究蛋白质折叠动力学

• 批准号: 21370072
• 负责人: TAKAHASHI Satoshi
• 金额: $ 12.06万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21370072/
• 关键词: フォールディング; 蛋白質; 折り畳み; ダイナミクス; 一分子検出; タンパク質; 一分子蛍光観察; 時系列データ; ラインフォーカス共焦点顕微鏡; 一分子観察; タンパク質の折り畳み; 蛍光測定装置; シトクロムc; β-ラクトグロブリン; マイクロ加工技術

In this project, we first developed spherical mirror system for the detection of fluorescence from single molecules for long periods. Based on the developed system, we successfully determined the energy landscape for cytochrome c. We next developed line conforcal microscopy for the fast time resolved measurements of single molecule fluorescence time series. The method was used to investigate the unfolded state dynamics of the B domain of protein A, and revealed the presence of substates in the unfolded ensemble. Further applications of the developed methods for other protein systems are currently underway.

在这个项目中，我们首先开发了用于长时间从单分子检测荧光的球形镜系统。基于开发的系统，我们成功地确定了细胞色素c的能量景观。下一步，我们开发了线条五体显微镜，用于单分子荧光时间序列的快速分析测量值。该方法用于研究蛋白A的B结构域的展开状态动力学，并揭示了未折叠的合奏中的取代。目前正在进行针对其他蛋白质系统的开发方法的进一步应用。

项目成果

一分子測定法による乳性蛋白質βーラクトグロブリンの折り畳み過程の観測

单分子测量法观察乳蛋白β-乳球蛋白的折叠过程

• 发表时间: 2009
• 作者: 門脇喬之;鎌形清人;小井川浩之;櫻井一正;後藤祐児;高橋聡
• 通讯作者: 高橋聡

Protein Folding and Misfolding Shining Light by Infrared Spectroscpy, Watching Dynamical Events in Protein Folding in the Time Domain from Submilliseconds to Seconds : Continuous-Flow Rapid-Mixing Infrared Spectroscopy

蛋白质折叠和错误折叠通过红外光谱闪耀，在亚毫秒到秒的时域内观察蛋白质折叠的动态事件：连续流快速混合红外光谱

• 发表时间: 2011
• 作者: Satoshi Takahashi;Tetsunari Kimura
• 通讯作者: Tetsunari Kimura

STARING AT A PROTEIN Single-Molecule and Ensemble Investigations of Protein Folding Dynamics

凝视蛋白质单分子和蛋白质折叠动力学的整体研究

• 发表时间: 2009
• 作者: 水野克秀;張進;中村洋子;村上緑;神山勉;Satoshi Takahashi
• 通讯作者: Satoshi Takahashi

Staring at a protein : ensemble and single molecule invesitigations on prtein folding dynamics

凝视蛋白质：蛋白质折叠动力学的整体和单分子研究

• 发表时间: 2010
• 期刊: Advances in Chemical Physics (in press)
• 作者: 高橋聡;鎌形清人
• 通讯作者: 鎌形清人

新規一分子蛍光観測法による蛋白質の折り畳みのエネルギー地形の解明

使用新型单分子荧光观察方法阐明蛋白质折叠的能量景观

• 发表时间: 2011
• 作者: 鎌形清人;馬場昭典;小松崎民樹;高橋聡
• 通讯作者: 高橋聡