炎症性サイトカイン関連遺伝子変異マウスを用いて歯周組織破壊と再生の機序を解析する

利用炎症细胞因子相关基因突变小鼠分析牙周组织破坏与再生机制

基本信息

批准号：
12307041
负责人：
山口朗
金额：
$ 27.22万
依托单位：
Nagasaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12307041/
关键词：
歯周病サイトカイン TNF TNF受容体 IL-1 ノックアウトマウス

项目摘要

今年度は次のような実験を行い、以下の結果を得た。1.TNF受容体欠損マウスの骨格の解析TNF receptor type I(TNFRI)およびTNF reptor type II(TNFRII)の各受容体ノックアウトマウス及び両受容体ノックアウトマウスを米国Jackson Laboratoriesから購入し当大学で繁殖させ、実験に用いた。TNFRIノックアウトマウスではレントゲンで骨量が増加している所見がみられたので、pQCTにより解析した所、TNFRIノックアウトマウスの骨量はTNFRIIノックアウトマウス及び野生型マウスより骨量が多い事が判明した。現在、組織学的にこれらのマウスの骨を解析中である。2.TNF受容体欠損マウスにおける骨再生機構の解析TNFRIノックアウトマウスにおける骨再生は,TNFRIIノックアウトマウス及び野生型マウスより促進している可能性を示唆する所見が得られた。3.TNF受容体欠損マウスにおける異所性骨形成能の検討筋肉内にBMPを移植すると移植部に異所性骨形成が誘導される。この実験系を用いてTNF受容体欠損マウスにおける異所性骨形成能を解析した。その結果、TNFRIノックアウトマウスにおける異所性骨形成は,TNFRIIノックアウトマウス及び野生型マウスより効率良く起こることが示唆された。4.TNF受容体欠損マウスより骨芽細胞様細胞株を樹立する試みTNFRIノックアウトマウス,TNFRIIノックアウトマウス及び両受容体ノックアウトマウスの新生仔頭蓋冠より骨芽細胞様細胞を分離し,継代培養を繰り返し,不死化細胞株の樹立を試みている。5.IL-1alphaまたはIL-1beta欠損マウスを東京大学医科学研究所の岩倉教授より供与していただき、現在各マウスを繁殖中である。

今年，我们进行了以下实验并得到了以下结果。 1.TNF受体缺陷小鼠的骨骼分析 TNF受体I型(TNFRI)和TNF受体II型(TNFRII)受体敲除小鼠及两种受体敲除小鼠均购自美国杰克逊实验室，在我校饲养，使用。在实验中。在TNFRI敲除小鼠中，X射线图像显示骨量增加，pQCT分析显示TNFRI敲除小鼠的骨量高于TNFRII敲除小鼠和野生型小鼠。我们目前正在对这些小鼠的骨骼进行组织学分析。 2. TNF受体缺陷小鼠的骨再生机制分析我们的研究结果表明，TNFRI敲除小鼠的骨再生可能比TNFRII敲除小鼠和野生型小鼠更快。 3. TNF受体缺陷小鼠异位骨形成能力的检查当BMP植入肌肉时，在植入部位诱导异位骨形成。使用该实验系统，我们分析了 TNF 受体缺陷小鼠的异位骨形成能力。结果表明，TNFRI 敲除小鼠的异位骨形成比 TNFRII 敲除小鼠和野生型小鼠更有效。 4.尝试建立来自TNF受体缺陷小鼠的成骨细胞样细胞系从TNFRI敲除小鼠、TNFRII敲除小鼠和两种受体敲除小鼠的新生颅骨中分离成骨细胞样细胞，并进行传代培养。永生化细胞系。 5.我们从东京大学医学科学研究所岩仓教授那里接收了IL-1α或IL-1β缺陷小鼠，目前正在对每只小鼠进行繁殖。