EpCAM+初代培養腺管を用いた膵がん薬剤感受性因子のプロフィリング

使用 EpCAM+ 原代培养导管分析胰腺癌药物敏感性因素

• 批准号: 23790760
• 负责人: 河本 徹
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Asahikawa Medical College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23790760/
• 关键词: 癌; 臨床; 薬剤反応性; 化学療法

代謝拮抗剤塩酸ゲムシタビンは膵癌に対する薬物治療の第一歩となったが、未だその難治性の克服には至っていない。本研究ではがん幹細胞(様細胞)をターゲットとした薬物治療のスクリーニング系の確立を目指し、外科切除組織などから初代培養法によりEpCAM陽性膵異形腺管を得て、生体内での環境に類似した3D培養条件下での、薬剤感受性の評価系の構築に取り組んで来た。まず、ヒト膵癌にきわめて類似する浸潤癌を生じるPdx1-Cre ; LSL-KrasG12D ; p53lox/+マウスより、既報(Kondo J, et al : PNAS 108 ; 2011)に従って、異形膵管を調整し、血清含有培地(基本培地)を用いたPlasticdishでの接着培養(2Dculture)をコントロールとして、matrigel等を用いた3D cultureにおいてsphere状態となった細胞集塊での遺伝子発現を比較した。3D culture条件下において、Stemness関連遺伝子、薬剤耐性遺伝子のいくつかは有意に発現が高かった。また、細胞増殖に伴うspheroidalorganoidのサイズの増大を短期間に簡便にモニタリングできる条件を見いだした。これらの遺伝子改変マウスから得られたプレリミナリーな培養諸条件をもとに、研究2年目である本年は、ヒト膵がん患者から得た組織検体を用いて、初代膵異形腺管の分離、培養を試みた。具体的には、研究計画で当初予定していた採取法に則り、膵がん患者に十分な説明と同意の下、通常検査で施行される超音波内視鏡下穿刺生検(EUS-FNAB)時に採取される検体を用いた。採取器具としては、25G,22G,19Gと穿刺針を替え検体の採取を試みたが、穿刺針のゲージ数を上げても通常得られる検体量は微量であり、FNAにより得られた微量異形膵管検体からはマウス検体や切除検体の場合とは異なり、3D cultureを行ってもsphere状態となった細胞集塊を確保する事はきわめて困難であった。また、研究者本人が、異動となり研究継続が不可能となったため、当初研究期間3年で申請していた研究内容を1年半で中止とし、以降の研究助成金交付の取消し手続きを行った。

抗代谢抗氧化剂吉西他滨盐酸盐已成为胰腺癌药物治疗的第一步，但尚未克服其棘手的性质。在这项研究中，我们旨在建立针对癌症干细胞（例如细胞）的药物治疗的筛查系统，并一直致力于建立一个系统，用于在3D培养条件下评估药物易感性，类似于从体内环境中获得EPCAM阳性胰腺阳性胰腺阳性胰腺畸形型肌电型管道。首先，在PDX1-CRE中； lsl-krasg12d; p53lox/+小鼠产生与人类胰腺癌非常相似的侵入性癌症，根据先前报道的（Kondo J等：PNAS 108; 2011; 2011）的杂质胰管进行调整，并在细胞簇中表达3D培养物中的细胞簇中的基因表达。含血清的培养基（碱性培养基）。在3D培养条件下，某些与干性相关的基因和耐药性基因的表达更加明显。此外，我们发现了短期监测与细胞增殖相关的球形甲基机构大小增加的条件。基于从这些基因修饰的小鼠获得的初步培养条件，今年是研究的第二年，我们尝试使用从人类胰腺癌患者获得的组织样品分离和培养主要的胰腺畸形管道。具体而言，根据研究计划中最初计划的收集方法，在正常测试中进行的超声内窥镜穿刺活检（EUS-FNAB）中采集样品，并有足够的解释并同意胰腺癌患者。作为一种收集设备，我们试图收集被25克，22克和19克代替的标本，但是即使增加了穿刺针的数量，通常可以获得的标本量也很小，而且与鼠标标本或切除的样品相同，也很难确保能够在3D培养物中变成细胞分组。此外，自从研究人员本人被转移并且无法继续他的研究变得不可能，因此他最初在三年研究期间申请的研究内容被取消了一年半后，随后的研究赠款被取消。

项目成果

The paracrine effect of hedgehog on bone marrow-derived stromal cells occurs at later stages of pancreatic tumorigenesis. American Gastroenterology Association; Topic Forum. Biology of the pancreas

刺猬蛋白对骨髓源性基质细胞的旁分泌作用发生在胰腺肿瘤发生的后期。

• 发表时间: 2011
• 作者: Sugiyama Y;Mizukami Y;Kawamoto T;Sasajima J;Koizumi K;Nomura Y;Moriichi K;Fujiya M;Bardeesy N;Chung DC;and Kohgo Y.
• 通讯作者: and Kohgo Y.

新しい消化器疾患動物モデル（第２回）新たな膵発癌モデル

新型消化系统疾病动物模型（二）新型胰腺癌发生模型

• 发表时间: 2011
• 期刊: 分子消化器病
• 作者: 水上裕輔;河本 徹;高後 裕．
• 通讯作者: 高後 裕．