気道に分泌されたムチンが酵素としての性質を持ち、自己のマルチマー化を触媒する!?

分泌到呼吸道中的粘蛋白具有酶特性并催化其自身的多聚化！？

• 批准号: 10877392
• 负责人: 宮田 健
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10877392/
• 关键词: 気道; 粘液; 痰

我々は、従来、単に粘膜被覆物質としての認識しかなかった分泌型ムチンが酵素としての活性をもつという新規の発想をここに提唱した.これは、あくまでも一次止血に関わるvon Willebrand factor(vWf)の酵素活性領域との相同性から推察したものであるが、もし、そうであれば、ムチンの酵素活性はおそらく自己のマルチマー形成に関わることが予想された。この研究成果は酵素学領域への新しい研究素材提供という基礎的な面だけでなく、粘稠な気道分泌物を伴う慢性呼吸器疾患の治療薬の開発研究に新しい方向性を示し得ると考えた.本研究では,まず,MUC2のD3とGSTのfusion蛋白を作成し、酵素一基質実験を行うことにした.現在,His-tagについて試みているが,サブクローニングはうまく行かず,現在,方法を検討中である.また,バキュロウイルスの発現系を確立し,この目的のために準備中である.関連実験として,粘液を抗原にして,モノクローナル抗体を作成した.その抗体は,分泌型粘液に反応し,糖鎖をエピトープとして認識していることがわかった.この抗体は,各種研究施設に提供し,種々の研究目的に使用されている.

我们在这里提出了一个新的想法，即以前仅被认为是粘膜覆盖物质的分泌性粘蛋白具有酶活性，这是从与酶活性区域的同源性推断的，如果是这样，则粘蛋白的酶活性。可能会参与其自身多聚体的形成。我们相信，这项研究成果不仅将为酶学领域提供新的研究材料，也为气道粘稠分泌物相关慢性呼吸道疾病的治疗药物的研发指明了新的方向。我们首先创建了MUC2 D3和GST的融合蛋白，并进行了酶-底物实验。目前，我们正在尝试使用His-tag，但亚克隆是不可能的。我们没有成功，所以我们目前正在考虑方法。我们还建立了杆状病毒表达系统，并正在为此目的做准备。作为相关实验，我们使用粘液作为抗原创建了单克隆抗体，发现该抗体与分泌的抗体发生反应。粘液并将糖链识别为表位。该抗体已提供给各种研究机构并用于各种研究目的。

项目成果

M.Okumura et al.: "Effects of Eosinophil-granule mejor basic protein on phosphatidylcholine secretion in rat type II pneumocytes" Am.J.Physiol.印刷中. (1999)

M.Okumura 等人：“嗜酸性粒细胞颗粒主要碱性蛋白对大鼠 II 型肺细胞磷脂酰胆碱分泌的影响”Am.J.Physiol，出版中。