Studies on development of avian embryo after ICSI

ICSI后禽胚胎发育的研究

• 批准号: 19580325
• 负责人: SHIMADA Kiyoshi
• 金额: $ 2.33万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19580325/
• 关键词: 細胞内精子顕微注入(ICSI); 精子由来卵子活性化因子; phospholipase PLCζ; cRNA; 胚盤葉; 外来遺伝子GFP; トランスジェニックウズラ; PLCzeta; ICSI; GFP; ウズラ; 胚盤葉発生; 顕微授精(ICSI); phospholipase Czeta (PLCzeta); ストロンチウム; Ca^<2+>; 発生率

非ウィルス法による鳥類トランスジェニック作出は、成功率が極めて低い。よって本研究は、細胞質内精子顕微注射法(Intracytoplasmic Sperm Injection, ICSI)による遺伝子導入法を試みた。外来遺伝子としてGreen Fluorescent Protein(GFP)を単一射出精子とPLCzeta cRNAと同時に注入し、ウズラ胚にGFPを発現させるた。pCX-E GFPプラスミドとPLCzeta cRNAをウズラ未受精卵に同時に顕微注入し、24時間の体外培養(System Q1a)と48時間の追加体外培養の結果、外来遺伝子GFPを胚盤葉で発現していることが観察できた。

鸟类转基因的非病毒转基因产生的成功率很低。因此，这项研究尝试使用胞质内精子注射（ICSI）转移基因转移。同时将绿色荧光蛋白（GFP）与单个弹出的精子和plczeta crna一起注射为外源基因，从而导致GFP在鹌鹑胚胎中表达。将PCX-E GFP质粒和Plczeta CRNA同时注射到未受精的鹌鹑蛋中，经过24小时的体外培养（系统Q1A）和48小时的额外体外培养，可以观察到外源基因GFP在胚胚中表达。

项目成果

Identification of differentially expressed genes involved in the regression and development of Mullerian duct of chicken

鸡苗勒管退化和发育相关差异表达基因的鉴定

• 发表时间: 2009
• 期刊: International Journal of Developmental Biology 52
• 作者: Ha Y;Tsukada A;Saito N;Shimada K
• 通讯作者: Shimada K

Effects of aromatase inhibitor (Fadrozole)-induced sex-reversal on gonadai differentiation and mRNA expression of P450axm, AMH and ERa in quail embryos and growth in posthaching quail.

芳香酶抑制剂（法屈唑）诱导的性逆转对鹌鹑胚胎性腺分化和 P450axm、AMH 和 ERa mRNA 表达以及孵化后鹌鹑生长的影响。

• 发表时间: 2008
• 期刊: Journal of Poultry Science 45
• 作者: Koba N;Mori M;Ha Y;Mizushima S;Tsukada A;Saito N;Shimada K.
• 通讯作者: Shimada K.

Developmental enhancement of intracytoplasmic sperm injection(ICSI)-generated quail embryos by phospholipase Cζ

磷脂酶 Cζ 促进胞浆内单精子注射 (ICSI) 产生的鹌鹑胚胎的发育

• 发表时间: 2008
• 期刊: Journal of Poultry Science 45
• 作者: Mizushima S;Takagi S;Ono T;Atsumi Y;Tsukada A;Saito N;Shimada K.
• 通讯作者: Shimada K.

ウズラ卵子DNase I活性に及ぼす精子数の効果

精子数量对鹌鹑卵母细胞DNA酶I活性的影响

• 发表时间: 2009
• 作者: 杉本;宰甫
• 通讯作者: 宰甫

Effects of aromatase inhibitor(Fadrozole)-induced sex-reversal on gonadal differentiation and mRNA expression of P450arom, AMH and Erα in quail embryos and growth in posthaching quail

芳香酶抑制剂(法屈唑)诱导性逆转对鹌鹑胚胎性腺分化及P450arom、AMH、Erα mRNA表达及鹌鹑孵化后生长的影响

• 发表时间: 2008
• 期刊: Journal of Poultry Science 45
• 作者: Koba N;Mori M;Ha Y;Mizushima S;Tsukada A;Saito N;Shimada K
• 通讯作者: Shimada K