白血病および固形がん化学療法のための多剤耐性克服高分子の開発

开发用于白血病和实体瘤化疗的克服多药耐药性的聚合物

基本信息

批准号：
18700433
负责人：
西原正通
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Kanagawa Academy of Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年度までにPgpなどの膜タンパク質を介したがんの多剤耐性を克服するため,プロトンスポンジ効果を誘起するN,N-(dimethylamino)ethyl methacrylateと抗がん剤であるアドリアマイシン(ADR)を結合させるメタクリル酸10mol%導入した共重合体をラジカル重合により合成した。このポリマーにADRを化学的に導入して,白血病由来細胞K562とそのADM耐性株K562/ADMへの抗がん活性を調査し,作製したポリマーの多剤耐性克服能の評価を行った。結果として,作製したポリマーを細胞に添加しても,十分にK562/ADMの多剤耐性を低下させることが出来なかった。この理由として,ADRとポリマー間の距離が短いため,ポリマー主鎖による立体的なかさ張りによりPgpのADR認識が阻害されている可能性が示唆された。また,ポリマー自身が当初想定していた機序(エンドサイトーシスにより細胞内に取り込まれ,リソソーム内のPhが低下し,プロトンスポンジ効果により細胞質内に放出される)通りに取り込まれていない可能性も考えられた。そこで,ポリマーの細胞内動態を蛍光顕微鏡観察により調査した。顕微鏡観察用の細胞として,接着性の細胞であるMCF-7とそのADR耐性株MCF-7/ADRを用いた。それぞれの細胞においてポリマーの細胞内取込は確認された。しかしながら,リソソーム内にポリマーはほとんど見られなかったため,ポリマーはリソソームからプロトンスポンジ効果を利用して細胞内に移行するのではなく,別のメカニズムで入っている可能性が高い事が示唆された。ポリマーはアドリアマイシン単体とは異なる挙動を示し,核内へはほとんど移行せず,核近傍に局在する傾向が見られた。ポリマーの細胞内への移行は確認されていることから,ポリマーがPgpの基質としてより認識されるように,ADRとポリマー間のスペーサーを適度な長さに調整し,細胞膜もしくはその近傍に局在できるような疎水性部位を導入することで,多剤耐性の克服が可能となると考えられる。

到去年，为了克服通过膜蛋白（例如PGP）的多种抗抗性，含有10 mol％甲基丙烯酸的共聚物，它结合N，N-（Dimethylamino）甲基丙烯酸乙酯，可诱导质子海绵效应，抗癌药物Adriamcin（adriamcin），由prandiation randiations randiation randiations randiations randiations randication synersizations and synsissys synsissys synsises，Was was was wassation）。将ADR化学引入该聚合物中，以研究针对白血病衍生细胞的抗癌活性K562及其耐药菌菌株K562/ADM，并评估制备的聚合物克服多药耐药性的能力。结果，即使将准备好的聚合物添加到细胞中，也无法充分降低K562/ADM的多药耐药性。这表明，由于聚合物主链引起的空间膨胀，由于ADR和聚合物之间的短距离，可能会抑制PGP的ADR识别。也可能没有将聚合物本身纳入最初设想的机制中（通过内吞作用纳入细胞，降低溶酶体中的pH，而由于质子海绵效应而释放到细胞质中）。因此，通过荧光显微镜研究了聚合物的细胞内动力学。粘附细胞MCF-7及其耐ADR菌株MCF-7/ADR用作显微镜观察的细胞。在每个细胞中证实了聚合物的细胞内摄取。但是，由于在溶酶体中很少发现聚合物，因此建议聚合物可能包含在不同的机制中，而不是使用溶酶体的质子海绵效应进入细胞。该聚合物的行为与仅阿霉素的行为不同，发现它几乎没有易位到核中，并且位于核附近。由于已经确认聚合物可以迁移到细胞中，因此可以通过将ADR和聚合物之间的间隔物调整为中等长度来克服多剂耐药性，从而使聚合物更加识别为PGP的底物，并在细胞膜附近或附近引入疏水位点。