EphA2/EphA4変異マウスを用いた腎嚢胞性疾患発症の分子メカニズムの解明

使用 EphA2/EphA4 突变小鼠阐明肾囊性疾病发生的分子机制

基本信息

批准号：
18700395
负责人：
成瀬智恵
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Kanazawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18700395/
关键词：
EphA2 EphA4 ephrinA MAPK 腎嚢胞性疾患破骨細胞腎臓形成尿管芽形成

项目摘要

EphA受容体型チロシンキナーゼはephrinAをリガンドとし,複数の受容体が複数のリガンドを共有しているごとが知られている。私の作成したEphA2/EphA4ダブル変異マウスにおいては胎生11.5目頃より尿管芽の拡張が見られ,腎嚢胞性疾患を発症したので,その分子メカニズムについて調べた。In situ hybridizationやRT-PCRにより,尿管芽形成の場においてはEphA2やEphA4が尿管芽に特異的に発現し,ephrinA1-5の全てが尿管芽と周辺の間絨織細胞に発現していることがわかった。EphAのシグナルカスケードの下流にはMAPKシグナルカスケードが存在することがこれまでに知られている。しかし,Tsaoらとの共同研究により,EphA2シグナルの下流ではなく上流にMAPKシグナルカスケードが存在し,EphA2の発現を誘導する可能性もあることがわかった(Zhang, et. al. 2008)。尿管芽形成に必須であるRet-GDNFシグナルカスケードの下流にはMAPKカスケードが存在することが知られており、Sprouty1変異マウスなどの腎嚢胞性疾患発症にはMAPKのカスケードの亢進が見られることがわかっている。よって,EphAシグナルとMAPKシグナルが複雑に関係して異所的な尿管芽細胞の増殖を抑制している可能性が出てきた。また,慶応大学の松尾先生との共同研究により,破骨細胞におけるEphA2およびEphA4の機能解析を進めた。その結果,EphA2/EphA4ダブル変異マウスの大腿骨骨量および骨密度が増加することがわかった。現在,分子メカニズムについてさらに解析中である。

EPHA受体型酪氨酸激酶已知以Ephrina作为配体，多种受体共有多种配体。在我创建的Epha2/epha4双突变小鼠中，输尿管芽从大约11.5胚胎眼中扩张，并产生了肾囊性疾病，因此我研究了分子机制。原位杂交和RT-PCR表明，在输尿管芽的形成中，Epha2和Epha4是特异性表达的，并且在输尿管芽和周围的绒毛细胞中表达Ephrina1-5。迄今为止众所周知，MAPK信号级联存在于EPHA信号级联的下游。但是，与Tsao等人的合作。发现MAPK信号级联反应存在于Epha2信号的上游而不是下游，这也可能诱导EPHA2表达（Zhang等，2008）。众所周知，MAPK Cascade位于RET-GDNF信号级联反应的下游，这对于输尿管芽形成至关重要，并且在肾囊性疾病（如Sprouty1突变小鼠）的发展中，MAPK Cascade可以增强。因此，EPHA信号和MAPK信号可能处于复杂的关系中，以抑制异位输尿管囊性增殖。此外，与Keio University的Matsuo教授合作，我们在破骨细胞中对EPHA2和EPHA4进行了功能分析。结果表明，双突变小鼠中股骨质量和骨密度增加。目前正在进行分子机制的进一步分析。