ヒ素誘導発癌の機序解析と新予防法の開発・実践

砷致癌机制分析及新预防方法的开发和实施

基本信息

批准号：
05F05444
负责人：
加藤昌志
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Chubu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

バングラデシュをはじめとするアジア地域の飲用地下水のヒ素汚染は国際的に最も注目されている環境問題の一つである。バングラデシュでは、1千万人の慢性ヒ素中毒患者の間で、すさまじい勢いで癌が増加している。しかし、ヒ素が発癌を誘導する機序はほとんど不明で、適切な予防・治療方法はないのが現状である。本研究では、c-RET癌原遺伝子産物やRET癌遺伝子をNIH3T3細胞(transfectant)やマウス(transgenic mouse)に導入し、RETを介した癌化機構を調べた。さらに、ヒ素が、この過程にどのように作用するのかについて調べ、以下の結果を得た。【試験管内における解析】1)10-1000μMのヒ素は、試験管内において、c-RETキナーゼの活性を亢進した。2)10-1000μMのヒ素は、すでに二量体化により活性化されているRET-MEN2Aキナーゼの活性をさらに亢進させた。3)ヒ素介したRETキナーゼの活性化には、RET分子におけるチロシン905及びチロシン1062のリン酸化が関与している可能性を示した。4)ヒ素を介したRETキナーゼの活性化には、RET分子内のシステインが関与している可能性を示した。5)現在、A)ヒ素がRET分子のシステインに直接bindするのかどうか、B)bindするのであれば、どのシステインが標的となるのか、について質量分析機を用いて、直接的に証明しようとしている。【生体内における解析】RET-トランスジェニックマウスに自然発症した良性腫瘍〜悪性腫瘍を用い、マイクロアレイ等の方法により、癌化制御に関連する分子を見つけ、機能を解析している。

包括孟加拉国在内的亚洲国家饮用水地下水砷污染是国际上最受关注的环境问题之一。在孟加拉国，有1000万慢性砷中毒患者的癌症发病率正以惊人的速度增加。然而，砷致癌的机制尚不清楚，目前也没有合适的预防或治疗方法。在本研究中，我们将c-RET原癌基因产物和RET癌基因引入NIH3T3细胞（转染子）和小鼠（转基因小鼠）中，并研究RET介导的致癌机制。此外，我们研究了砷如何影响这一过程并获得了以下结果。 [体外分析] 1) 10-1000μM砷在体外增强c-RET激酶的活性。 2) 10-1000 μM 砷进一步增强了已经通过二聚化激活的 RET-MEN2A 激酶的活性。 3）研究表明，RET分子中酪氨酸905和酪氨酸1062的磷酸化可能参与砷介导的RET激酶激活。 4）RET分子中的半胱氨酸可能参与砷介导的RET激酶激活。 5）我们目前正在使用质谱法来直接证明A）砷是否直接与RET分子中的半胱氨酸结合，以及B）如果是，则哪个半胱氨酸是目标。 [体内分析] 利用RET转基因小鼠自发产生的良性至恶性肿瘤，利用微阵列等方法寻找与控制癌变相关的分子并分析其功能。