いかにして大脳皮質神経細胞の最終配置部位が決定されるのか?

大脑皮层神经元的最终位置是如何确定的？

基本信息

批准号：
15700277
负责人：
味岡逸樹
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

大脳皮質神経細胞の最終配置部位決定に、脳室帯で発現する短距離作動性液性因子の関与が示唆されている。近年、領域特異的に発現している分子の網羅的な探索にはアフィメトリクス社のGeneChipがよく利用されているが、その後のin situ hybridizationによるスクリーニングや機能解析には個々の因子を個別にクローニングする必要があり、多大な労力を必要とする。そこで我々は、独自にPerl Scriptプログラムを作成して、個々のGeneChipクローンを、60,770クローンのマウス全長cDNAライブラリーである理研FANTOMクローンに対し対応付けを行った。その結果、従来アフィメトリクス社で48.3%のクローンに対してしか注釈付けされていなかったGene Symbolを76.9%のクローンに対して注釈付けすることができた。さらに、そのアミノ酸配列の物理化学的な性質に基づき、分泌因子及び細胞表面因子の選別を行い、その選別の精度が既知の論文データとの比較により88.6%と判定された。この系を用いて、脳室帯で発現し、皮質板で発現していない分泌因子及び細胞表面因子として426クローンが得られ、in situ hybridization法によるさらなる絞り込みで脳室帯特異的な分泌因子及び細胞表面因子として88クローンを同定した。さらに私は、同定したクローンの1つであるS1P1に着目し解析した結果、大脳皮質神経細胞がS1P1依存的に脳室下帯から中間帯にかけて、カドヘリン複合体を形成するα-cateninのタイプがαE-cateninからαN-catenin IIへとスイッチングすることが判明した。本年度の研究により、脳室帯で発現し、神経細胞の最終配置部位を制御する候補因子が多数同定され、脳室帯で起こるイベントの一部が明らかになった。

脑皮质细胞的最终放置位点表明，大脑室中表达的短距离活性液体因子参与。近年来，经常使用副标士，用于对该地区特别表达的分子进行全面搜索，但是随后通过原位杂交点击了单个因素进行筛选和功能分析。因此，我们自己创建了一个Perl脚本程序，以对60,770个克隆鼠标整体cDNA库的Riken Clone响应单个Genechip克隆。结果，仅针对48.3％的克隆被注意的基因符号能够记录到克隆的76.9％。此外，根据氨基酸序列的物理化学特性，选择了分泌和细胞表面因子，并且通过比较已知的纸张数据，选择的准确性为88.6％。使用该系统，将426个克隆作为分泌因子和细胞表面因子在脑室中表达而不是在皮质板上表达，并在原位杂交方法中进一步缩小了脑室特异性分泌因子和88克隆被确定为细胞表面因子。此外，由于聚焦和分析S1P1的结果，S1P1是一种鉴定的克隆，是从下脑室形成Cadhhelin络合物的α-catenin型，以形成Cadhhelin络合物。 -Catenin II。今年的研究已经确定了在大脑室中表达的大量候选因素，并控制神经细胞的最终放置位点，以及大脑房间中发生的一些事件。