リーリン結合型スポンジ培養によるリーリンの機能解析

通过 Reelin 结合海绵培养物对 Reelin 进行功能分析

基本信息

批准号：
01J06948
负责人：
味岡逸樹
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Keio University (2002)Jikei University School of Medicine (2001)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

大脳皮質神経細胞は、最終的に配置される皮質層ではなく、脳室側にある脳室帯で誕生し、中間帯を経由して、髄膜側の辺縁帯直下まで移動して最終分化する。この繰り返しにより、早生まれの細胞は大脳皮質層の深層に、遅生まれの細胞は浅層に配置され、6層からなる大脳皮質層が形成される。Reelin欠損マウスでは、本来各層に集合して局在すべき神経細胞群が分散して配置し、大脳では、全体として層構造の逆転を示す。しかしながら、正常マウスにおいても、大脳皮質層特異的な細胞同士の分離機構があるかどうか、さらには、正しい層形成が起こるために、細胞は辺縁帯直下まで移動する必要があるかどうかもわかっていない。そこで、Reelinの生物学的機能を解明するために、皮質層特異的な細胞同士の分離機構に着目した。はじめに、予備的な実験として,正常マウスにおける脳室帯と中間帯から単離された神経細胞の細胞同士の分離能に着目し、誕生時期依存的な分離機構があるかどうか検討した。その結果、大脳皮質神経細胞には誕生時期依存的な細胞同士の分離機構があり、この分離能は、辺縁帯直下までの神経細胞移動を必要としないことが示唆された。さらに、この細胞同士の分離機構が層形成に関与するかどうか検討するために、特定の時期に誕生した神経細胞で特異的に発現している遺伝子群を、DNAチップを用いて網羅的に解析し、in situ hybridization法により、候補の遺伝子群の絞り込みを行った。その結果、大脳皮質神経細胞の誕生時期に依存して発現する、いくつかの新規及び既知遺伝子が見つかった。

脑皮质神经元出生在心室区域，而不是最终所在的皮质层，而是在心室侧的心室区域，然后穿过脑膜侧边缘区以下右下方的中间区以最终区分。这种重复会导致早期出生的细胞被放置在脑皮质层中，并将后长生物的细胞置于浅层皮质层中，形成六层。在没有reelin的小鼠中，最初应收集并定位在每一层中的神经元细胞分布和排列，在大脑中，整体层的结构被反转。但是，尚不清楚是否存在一种在彼此特异的脑皮质层之间分离细胞的机制，以及是否需要细胞直接在边缘区域下方迁移以进行正确的层形成。因此，为了阐明reelin的生物学功能，我们专注于特定于皮质层的细胞的分离机理。首先，作为初步实验，我们专注于正常小鼠中从心室区和中间区分离的神经元细胞的分离能力，并检查了是否存在依赖性分离机制。结果表明，皮质神经元具有取决于出生时间的细胞间分离机制，并且这种分离能力不需要直接在边缘区域以下的神经元迁移。此外，为了研究细胞之间的这种分离机制是否参与层形成，使用DNA芯片对在特定时间出生的神经元细胞中特异性表达的基因进行了全面分析，并通过原位杂交对候选基因组进行了范围。结果，发现几种新颖的基因根据脑皮质神经元的出生时间而表达。