糖転移酵素分泌を制御するBACE1プロテアテーゼとアミノペプチダーゼ

BACE1 蛋白酶和氨肽酶控制糖基转移酶分泌

基本信息

批准号：
15770090
负责人：
北爪しのぶ
金额：
$ 1.98万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15770090/
关键词：
BACE1 アミノペプチダーゼシアル酸転移酵素 ST6Gal I PST 分泌 LEC ノックアウトマウス肝炎

项目摘要

本研究者らは、以前にBACE1プロテアーゼがシアル酸転移酵素を切断し分泌されることを培養細胞系およびin vitroの実験系で見いだした。今年度は、BACE1ノックアウトマウスの解析を行った。そして、野生型マウスと異なり、ノックアウトマウスの血漿中の可溶型ST6Gal Iが約3分の1程度に減少していることを明らかにした(J.Biol.Chem(2005)280,8589-8595)。また、肝炎モデルLECラットにおいては、肝炎発症に先駆けてBACE1発現が増加し、血漿中の可溶型ST6Gal I量が増加していることも明らかにした。BACE1発現の増加する時期においてLECラットの肝臓は銅の蓄積による酸化ストレスにさらされている。従って、酸化ストレスがBACE1増加の引き金になったことが考えられた。また、BACE1が他の糖転移酵素をも基質とするかどうか検索を行ったところ、BACE1発現によりST3Gal I,II,III,IVの分泌が増加することが明らかになった(Glycoconjugate J.(2006)in press.)さらに、発現の増加したBACE1がST6Gal Iを切断することで、ST6Gal I産物であるSNAエピトープ量に特異的な変化が起きることも分かった。(論文準備中)。また、血液などの体液中の可溶型ST6Gal Iを定量するためのサンドイッチELISAを確立し、化学物質によって肝炎を惹起させたラットの血漿サンプルを測定している段階である。また、体液中のSNAエピトープ量を定量的に解析する方法を確立した。

本研究人员此前在培养细胞系统和体外实验系统中发现BACE1蛋白酶裂解唾液酸转移酶并分泌。今年，我们分析了 BACE1 基因敲除小鼠。他们还揭示，与野生型小鼠不同，敲除小鼠血浆中的可溶性ST6Gal I减少至约三分之一(J. Biol. Chem (2005) 280, 8589-8595)。我们还发现，在肝炎模型LEC大鼠中，肝炎发病前BACE1表达增加，血浆中可溶性ST6Gal I量增加。在BACE1表达增加期间，LEC大鼠的肝脏因铜积累而面临氧化应激。因此，认为氧化应激触发了BACE1的增加。此外，当我们搜索BACE1是否也使用其他糖基转移酶作为底物时，我们发现BACE1表达增加了ST3Gal I、II、III和IV的分泌（Glycoconjugate J.（2006）出版中。）此外，还发现表达增加的BACE1会裂解ST6Gal I，导致SNA表位的量发生特定变化，这就是ST6Gal I产物。（论文正在准备中）。此外，我们还建立了一种夹心ELISA来定量血液等体液中的可溶性ST6Gal I，目前正在测量由化学物质诱发肝炎的大鼠的血浆样本。我们还建立了一种定量分析体液中SNA表位含量的方法。