メタンフェタミン投与によるラット脳内NMDA型受容体サブユニットの変化について

甲基苯丙胺给药导致大鼠脑内 NMDA 型受体亚基的变化

• 批准号: 13770563
• 负责人: 豊田 裕敬
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Osaka Medical College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770563/
• 关键词: NMDA受容体; メタンフェタミン; 逆耐性現象; Westernブロッティング; Sensitization; ラット; NMDA型受容体; 免疫染色; Western blot法

主要なグルタミン酸受容体であるNMDA型受容体はキーサブユニットであるNR1とモジュレータとして作用するNR2サブユニットから構成されるヘテロマートして存在することが知られている。NR2サブユニットはNR2A、2B、2C、2Dに分類され、時間的、空間的に分布が異なることが知られている。一方、覚醒剤であるメタンフェタミン(以下MAP)はその投与により、逆耐性現象(sensitization)を生じ、統合失調症のモデルとして広く研究されている。しかしながら、幼若ラットにMAPを投与した場合には、逆耐性現象は生じないことが知られており、我々はこの逆耐性現象成立の分子生物学的基礎にNMDA受容体を構成するサブユニットの量的変化が関与しているとの仮説を立てた。このためにSD系雄性ラットに連続5日間MAPを腹腔内投与(4mg/kg/日)した後、3日後に早期離脱群をと殺、10日後に晩期離脱群をと殺し、脳を取り出した。コントロール群には同量の生理食塩水を投与し、10日目にと殺、脳を取り出した。取り出した脳は直ちに-80℃で保存した後、前頭葉皮質、線状体、側坐核、海馬、小脳の各部位の組織を切り出し、コントロール群、早期離脱群、晩期離脱群の3群に対しNR1、NR2A、2B、2Cに対して特異的な抗体を用いたWesternブロッティングを行いMAP投与による各サブユニットのペプチド量の差について検討を行った。結果として小脳ではコントロール群に比し、早期離脱群でNR1サブユニットの有意な増加と晩期離群でNR2Bサブユニットの有意な減少が確認された。現在データの再現性の確認のため、追加再実験を実施している。

NMDA型受体，主要的谷氨酸受体，被称为由关键亚基NR1和NR2亚基组成的杂种，其作用为调节剂。 NR2亚基分为NR2A，2B，2C和2D，已知具有不同的时间和空间分布。另一方面，甲基苯丙胺（以下称为MAP）是一种兴奋剂，会在给药时形成反向抵抗的现象，并被广泛研究为精神分裂症的模型。然而，众所周知，当将MAP施用到年轻大鼠时不会发生反电阻，我们假设构成NMDA受体的亚基的定量变化参与了分子生物学基础，以建立这种反抗性现象。为此，在连续5天将MAP进行了MAP施用后，用SD雄性大鼠腹膜内（4 mg/kg/day）进行了MAP，三天后牺牲了早期撤回组，十天后牺牲了较晚的戒断组，并消除了大脑。对照组给予了相同量的盐水，在第10天，将大脑去除。将提取的大脑立即储存在-80°C下，切除额叶皮层的每个部位，线性身体，振铃核，海马和小脑的组织，并使用针对NR1，NR1，NR2A，2B，2B，2B和2C组的抗体进行蛋白质印迹，并进行三组：对照组：较早的撤回组，以及较早的撤回组，并撤回了较早的组，并进行了较早的撤回组。通过地图给药检查了每个亚基中肽量的差异。结果，在小脑中，与对照组相比，NR1撤回组的NR1亚基显着增加，而晚期戒断组的NR2B亚基显着下降。当前，正在进行其他重新实验以确认数据的可重复性。

项目成果

Tadahito Hanaoka, Hirotaka Toyoda, Takafumi Mizuno, et al.: "Alterations in NMDA receptor subunit levels in the brain regions of rats chronically administered typical or atypical antipsychotic drugs"Neurochemical Research. (In press). (2003)

Tadahito Hanaoka、Hirotaka Toyoda、Takafumi Mizuno 等人：“长期服用典型或非典型抗精神病药物的大鼠脑区 NMDA 受体亚基水平的变化”神经化学研究。