樹状細胞の成熟に関与する分子群の同定と解析

树突状细胞成熟中涉及的分子群的鉴定和分析

• 批准号: 13770161
• 负责人: 星野 克明
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770161/
• 关键词: 免疫学; Toll-like receptor; 樹状細胞; 自然免疫; 分子生物学

自然免疫反応を誘起するTLRファミリーはマウスやヒトで12個存在し、各TLRが異なる病原体を認識することが明らかとなりつつある。これらTLRに特異的なリガンド(病原体成分)を用いて樹状細胞を刺激すると樹状細胞は成熟分化する。本研究では、野生型マウス、MyD88遺伝子欠損マウス、および種々のTLR欠損マウスの骨髄細胞をGM-CSF存在下で培養し、分化誘導した骨髄由来未熟樹状細胞を用いた。TLR4のリガンドとしてLPS、TLR2のリガンドとして合成リポペプチド、TLR9のリガンドとしてCpG oligo DNAを用いて樹状細胞を刺激し、刺激により発現誘導される遺伝子について検討を行った。その結果、刺激を行うリガンドの種類により、発現する遺伝子の種類に差が見られ、また遺伝子発現の経時変化にも特徴が見られた。1,TLR4のシグナル見られるMyD88を必要としないシグナル伝達経路により、まずインターフェロン-β(IFN-β)が誘導され、そのIFN-βが2次的にIFN誘導性遺伝子群を発現誘導していることが明らかとなった。2,TLR2のシグナルはMyD88を必要としており、MyD88欠損樹状細胞ではリガンド刺激による遺伝子の発現誘導が見られなかった。好生型で刺激により発現する遺伝子の種類は炎症性サイトカイン等であった。3,TLR9のシグナルもMyD88を必要としていた。遺伝子発現の経時変化は、TLR2やTLR4に比べて遅延していた。発現する遺伝子は炎症性サイトカインの他にIFN-βと、IFN-βにより2次的に発現誘導するIFN誘導性遺伝子群であった。さらに、MyD88欠損樹状細胞はLPS刺激により成熟し、T細胞活性化能を獲得することが明らかとなった。LPSの刺激は、野生型樹状細胞にTh1細胞分化を促すが、MyD88欠損樹状細胞にはTh2細胞分化を誘導することが明らかとなった。

有12个TLR家族在小鼠和人类中诱导先天免疫反应，并且很明显每个TLR都识别出不同的病原体。当这些TLR特异性配体（病原体成分​​）刺激树突状细胞时，它们将变得成熟。在这项研究中，在GM-CSF的存在下培养了来自野生型小鼠，MyD88基因缺陷小鼠和各种TLR缺陷小鼠的骨髓细胞，并使用了从已诱导的骨髓造成的未成熟树突状细胞培养。使用LPS作为TLR4的配体，合成的脂肽作为TLR2的配体，以及CpG Oligo DNA作为TLR9的配体刺激树突状细胞，并研究了刺激诱导的基因。结果，根据要刺激的配体的类型观察到表达的基因类型的差异，并且在基因表达的变化中也观察到了特征。 1。揭示了不需要MyD88的信号通路，这是1.TLR4的信号，首先诱导了干扰素-β（IFN-β），以及IFN-β基团的IFN-β次级表达。 2. TLR2信号需要MYD88，并且在缺乏MyD88缺陷的树突状细胞中未观察到配体刺激的基因表达诱导。肝脏刺激表达的基因类型是炎症细胞因子等。 3。TLR9信号也需要MYD88。与TLR2和TLR4相比，基因表达的时间依赖性变化延迟。除炎性细胞因子外，表达的基因还包括IFN-β和IFN诱导的基因，它们是IFN-β的次级表达。此外，揭示了MyD88缺陷的树突状细胞在LPS刺激后成熟并获得激活T细胞的能力。据表明，LPS的刺激促进了野生型树突状细胞中的Th1细胞分化，但是在MyD88缺陷的树突状细胞中，它会诱导Th2细胞分化。

项目成果

Tsuneyasu Kaisho: "Endotoxin-induced maturation of MyD88-deficient dendritic cells"The Journal of Immunology. 166・9. 5688-5694 (2001)

Tsuneyasu Kaisho：“内毒素诱导的 MyD88 缺陷树突状细胞的成熟”免疫学杂志 166・9（2001）。

Tsuneyasu Kaisho: "Endotoxin can induce MyD88-deficient dendritic cells to support T(h)2 cell differentiation"International Immunology. 14・7. 695-700 (2002)

Tsuneyasu Kaisho：“内毒素可以诱导 MyD88 缺陷的树突状细胞支持 T(h)2 细胞分化”国际免疫学 14・7 (2002)。

Katsuaki Hoshino: "Differential involvement of IFN-beta in Toll-like receptor-stimulated dendritic cell activation"International Immunology. 14・10. 1225-1231 (2002)

Katsuaki Hoshino：“IFN-β 在 Toll 样受体刺激的树突状细胞激活中的不同参与”国际免疫学 14・10（2002）。

Taro Kawai: "Lipopolysaccharide stimulates the MyD88-independent pathway and results in activation of IFN-regulatory factor 3 and the expression of a subset of lipopolysaccharide-inducible genes"The Journal of Immunology. 167・10. 5887-5894 (2001)

Taro Kawai：“脂多糖刺激 MyD88 独立途径并导致 IFN 调节因子 3 的激活和脂多糖诱导基因子集的表达”《免疫学杂志》167・10 (2001)。