世界的大流行をおこしている腸炎ビブリオ新クローンの病原性に関する分子遺伝学的研究

导致全球大流行的副溶血弧菌新克隆致病性的分子遗传学研究

基本信息

批准号：
13226051
负责人：
西渕光昭
金额：
--
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13226051/
关键词：
微生物食品衛生病原性疫学細菌

项目摘要

toxRS遺伝子は、コレラ菌で病原性発現調節のマスタースイッチとして報告された。腸炎ビブリオ新クローンのtoxRS遺伝子の塩基配列の中に特有的な塩基置換が存在する。しかし本研究においてtoxRS遺伝子そのものがビブリオ属細菌の病原性性発現には関与しないことを示した。ヒトでは感染実験が実施できないので、魚類病原性VibrioであるVibrio anguillarumにもtoxRS遺伝子が存在することを示し、そのtoxR遺伝子をノックアウトしたisogenicな変異株を構築した。本来の宿主であるアユへの自然感染実験において、toxR変異株ではまったく病原性の低下が認められないことを示した。新クローンがコレラ菌のCTXファージに類似するファージを保有し、特にゲノム中のORF8と命名された領域は、CTXファージの病原性関連遺伝子群に相当し、腸炎ビブリオ新クローンに特異的な配列であるとされている。本研究では、最近タイ、ベトナム、およびバングラデシュで患者から分離した新クローン菌株の中にORF8を欠く菌株がかなり存在することを示し、ORF8が新クローンの病原性や伝播に関係している可能性を否定した。既知の病原性関連遺伝子の関与が否定されたので、未知のDNA塩基配列を検索することにした。O3:K6型新クローンの代表株の全DNAをテスターとし、新クローンに属さないO3:K6型株の代表株の全DNAをドライバーとして、subtractive hybridization法によってO3:K6型新クローンの代表株のゲノムに特有なDNA塩基配列をスクリーニングした。そのようなDNA断片を含む可能性のある90クローンを得た。これらのDNA断片を対象にして、多数の新クローンと非新クローン菌株を用いたハイブリダイゼーションによる大規模なスクリーニング試験を実施中である。

据报道，TOXRS基因是霍乱细菌致病表达调节的主开关。在颤动的新克隆中，托克斯基因的基本序列中有独特的碱基替代。然而，这项研究表明，托克斯基因本身与弧菌属细菌的致病表达无关。由于人类感染实验不能在人类中进行，因此颤音是一种类似鱼类的致病颤音，也表明存在一个toxrs基因，构建了一个将toxr基因击倒的同基因突变体。在原始宿主的天然感染实验中，Toxr突变体表明根本不允许致病性。新的克隆具有类似于霍乱CTX噬菌体的噬菌体，尤其是基因组中名为ORF8的区域等同于CTX噬菌体的致病基因组，并且具有特殊的Entrion Initis timitis timitis timitis timitis timitis timitis timitis timitis timitiation New grone。这项研究表明，在泰国，越南和孟加拉国中，有很多新的克隆细菌菌株可能与我否认的新克隆人的病原体和传播有关。由于拒绝已知的致病基因的参与，因此我们决定寻找未知的DNA碱基序列。 O3：测试人员都是K6新克隆作为测试人员的DNA，而K6 -Type股票的所有DNA都不属于新克隆作为驱动程序，并且通过减法杂交法O3：K6 New Clone的代表性股份DNA基础序列筛选了基因组的特异性。获得了一个可能包含这种DNA片段的90个克隆。对于这些DNA片段，正在使用大量新克隆和非新克隆细菌库存进行大规模筛选测试。