陽炎ビブリオの病原因子遺伝子発現の調節機構

痔疮弧菌毒力因子基因表达的调控机制

基本信息

批准号：
03807024
负责人：
西渕光昭
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03807024/
关键词：
腸炎ビブリオ溶血毒病原因子遺伝子遺伝子発現調節

项目摘要

腸炎ビブリオの重要な病原因子である耐熱性溶血毒(TDH)をコ-ドする遺伝子(tdh)の発現を促進する調節因子(VpーToxR)を解析した。VpーToxRをコ-ドする遺伝子(VpーtoxR)はコレラ菌の病原因子発現調節因子(ToxR)の遺伝子と52%の相同性を有しており、推定アミノ酸配列も類似し、特に発現調節に関与すると推定される領域およびtransmembrane領域と考えられる部分では非常に強い売似性が認められた。大腸菌中で、クロ-ン化したtdh遺伝子とVpーtoxR遺伝子を共存させた系で、VpーToxRがtdh遺伝子(tdh1〜tdh4の中で特にtdh2およびtdh4)の発現を促進することを確認した。またtdh2遺伝子について、コ-ドン領域上流144bp付近の塩基配列がVpーToxRによる発現促進において重要な役割を果たしていることが明らかになった。ただし、ゲルシフト法によってVpーToxRの結合能を調べたところ、VpーToxRはコ-ドン領域のすぐ上流(68bpまで)に結合することを示唆する成績が得られ、さらに上流(144bp近付)の塩基配列は、結合したVpーToxRとの間の何らかの相互作用によってtdh2遺伝子の発現促進に関与しているのではないかと考えられた。VpーtoxR遺伝子プロ-ブを作製し、これを用いたハイブリダイゼ-ション試験により、この遺伝子はほとんどの腸炎ビブリオ菌株に存在することを明らかにした。AQ3815株を用いて、VpーtoxR遺伝子を特異的に不活化したisegenic変異株を作製した。この変異株と野生株との比較によって、VpーToxRによるtdh遺伝子の発現促進は、KPブロス中で菌を発育させた場合に特に顕著で、発現促進作用は転写レベル(mRNA)でおこっていることを聖らかにした。

分析了促进基因表达（TDH）的分析因子（VP-TOXR），该因子（TDH）分析了抗热溶血毒药（TDH）的基因（TDH），这是引起肠炎肺炎震颤的重要疾病。覆盖VP-TOXR的基因（VP-TOXR）具有52％的胆碱疾病因子表达（TOXR）的均匀性，并且估计的氨基酸序列在表达中相似，尤其是在表达中。估计区域和区域，估计涉及的区域以及跨膜区域。在大肠杆菌中，在TDH基因（尤其是TDH2和TDH4）中证实了VP-TOXR（尤其是TDH2和TDH4），该系统与黑色的TDH基因和VP-TOXR基因共存。还揭示了Kodon区域上游的TDH2基因附近的基本序列在促进VP-TOXR表达方面起着重要作用。但是，当Gelsift方法检查VP-TOXR的结合能力时，结果表明VP-TOXR将与Kodon区域的上游（最多68 bp）结合，在上游上游（接近144BP）。 TDH2基因的碱基序列由于合并的VP和TOXR之间的某种相互作用而促进TDH2基因的表达。 VP-TOXR基因亲构建，并使用其杂交杂交的杂种表明，该基因存在于大多数弧菌细菌菌株中。使用AQ3815股份，创建了特异性灭活VP -TOXR基因的垂直突变股。通过比较这种突变体和野生菌株，当在KP兄弟期间开发细菌时，通过VP -TOXR促进TDH基因的表达是特别的，并且在转录水平（mRNA）进行表达促进效应。。