おとり型核酸医薬と非ウイルスベクターの遺伝子導入法開発による新規がん治療戦略

基于诱饵型核酸药物的新型癌症治疗策略以及使用非病毒载体的基因转移方法的开发

• 批准号: 13218073
• 负责人: 森下 竜一
• 金额: $ 4.86万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13218073/
• 关键词: がん; 遺伝子治療; デコイ; NFkB; HVJ

我々は、転写抑制法としておとり型核酸医薬(デコイ)法を考案し、転写因子の直接制御を成熟個体で示してきたが、がん治療への応用は未だ十分でない。そこで、本研究ではデコイのがん治療への応用とそのストラテジーの開発を行う。また、デコイの臨床応用の上で必要不可欠な投与法の検討も行い、がん特異的な導入法の確立を目指す。その結果、1)転写調節因子NFkBに対するデコイの静脈投与は、マウス細網肉腫M6036の静脈播種による肝転移を有意に抑制した。更に、MMCとの併用はMMCの副作用(骨髄抑制など)を増加させることなく、肝転移を抑制した。更に、血管新生抑制に焦点を絞り、マトリックス分解酵素阻害に最適なデコイの設計を行い、NFkBとetsのダブルデコイにより単独に比べ、MMP-1阻害作用が有意に増強できることを見出した。2)プラスミドDNAをマイクロバブル(オプチゾン)に封入後、超音波照射により培養細胞及び生体局所において遺伝子導入効率が増強することを明らかにした。更に、がん抑制遺伝子p53を治療用遺伝子導入として同法で導入した結果、血管平滑筋細胞増強が抑制されることを明らかにした。また、本法は、核酸医薬の投与にも応用可能で、E2Fデコイの血管壁への導入を行った結果、マイクロバブルー超音波を用いることにより、血管平滑筋細胞の増殖を抑制できることも明らかになった。

我们将诱饵型核酸药物（诱饵）作为转录抑制方法，并且已经证明了成熟个体中转录因子的直接控制，但尚未充分应用于癌症治疗。因此，这项研究将开发诱饵在癌症治疗和策略中的应用。我们还将研究用于诱饵临床应用的基本给药方法，并旨在建立特定于癌症的引入方法。结果，1）由于小鼠网状肉瘤M6036的静脉传播，静脉注射诱导剂对转录调节剂NFKB静脉内显着抑制了肝转移。此外，当与MMC结合使用时，它抑制了肝转移而不会增加MMC的副作用（例如骨髓抑制）。此外，我们专注于抑制血管生成，并设计了一种诱饵，最适合抑制基质降解酶，并发现与鞋底相比，NFKB和ETS的双诱饵可以显着增强MMP-1抑制作用。 2）在将质粒DNA封装在微泡中（Optisone）之后，超声辐射表明，培养细胞和局部生物学位的基因转移效率提高了基因转移效率。此外，揭示了使用相同方法引入癌症抑制基因p53作为治疗基因转移，从而抑制了血管平滑肌细胞的增强。此外，该方法可以应用于核酸药物的给药，并且由于将E2F诱饵引入血管壁上，已经表明，使用微型玻璃超声可以抑制血管平滑肌细胞的增殖。

项目成果

Miyata T, Yamamoto S, Sakamoto K, Morishita R, Kaneda Y.: "Novel immunotherapy for peritoneal dissemination of murine colon cancer with macrophage inflammatory protein-1b mediated by a tumor-specific vector, HVJ catinonic liposomes"Cancer Gene Therapy. 8.

Miyata T、Yamamoto S、Sakamoto K、Morishita R、Kaneda Y.：“用肿瘤特异性载体 HVJ 卡汀尼克脂质体介导的巨噬细胞炎症蛋白 1b 进行小鼠结肠癌腹膜播散的新型免疫疗法”癌症基因疗法。

Otomo T, Yamamoto S, Morishita R, Kaneda Y.: "EBV replicon vector system enhances transgene expression in vivo : applications to gene therapy for cancer"The Journal of Gene Medicine. 3. 345-352 (2001)

Otomo T、Yamamoto S、Morishita R、Kaneda Y.：“EBV 复制子载体系统增强体内转基因表达：在癌症基因治疗中的应用”基因医学杂志。

Kawamura I, Morishita R(equal first author), Tsujimoto S, Manda T, Tomoi M, Tomita N, Goto T, Ogihara T, Kaneda Y.: "Intravenous injection of oligodeoxynucleotides to the NF-kappaB binding site inhibits hepatic metastasis of M5076 reticulosarcoma in mice"

Kawamura I、Morishita R（同一第一作者）、Tsujimoto S、Manda T、Tomoi M、Tomita N、Goto T、Ogihara T、Kaneda Y.：“向 NF-κB 结合位点静脉注射寡脱氧核苷酸可抑制 M5076 的肝转移

Yoshimura S, Morishita R, Hayashi K, Yamamoto K, Nakagami H, Kaneda Y, Sakai N, Ogihara T.: "Inhibition of intimal hyperplasia after balloon injury in rat carotid artery model using cis-element "decoy"of nuclear factor-kB binding site as a novel molecular

Yoshimura S、Morishita R、Hayashi K、Yamamoto K、Nakagami H、Kaneda Y、Sakai N、Ogihara T.：“使用核因子-kB的顺式元件“诱饵”抑制大鼠颈动脉模型球囊损伤后的内膜增生

Kawauchi M, Suzuki J, Wada Y, Morishita R, Kaneda Y, Isobe M, Amano J, Takamato S.: "Downregulation of nuclear factor kappa B expression in primate cardiac allograft arteries after E2F decoy transfection"Transplant Proc.. 33. 451 (2001)

Kawauchi M、Suzuki J、Wada Y、Morishita R、Kaneda Y、Isobe M、Amano J、Takamato S.：“E2F 诱饵转染后灵长类心脏同种异体移植动脉中核因子 kappa B 表达的下调”移植程序.. 33. 451