正常ヒト造血幹細胞における細胞内シグナル伝達機構の解析

正常人造血干细胞胞内信号转导机制分析

• 批准号: 13216089
• 负责人: 北川 誠一
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Osaka City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13216089/
• 关键词: 造血幹細胞; CD34; SCF; IL-6; G-CSF; MAPキナーゼ; STAT3; ERK

正常ヒト造血幹細胞(CD34陽性細胞)を用いた解析から、特定のMAPキナーゼサブタイプカスケード(MEK-ERK、MKK3/6-p38及びMKK4/7-JNK)がサイトカイン(SCF、G-CSF、TPO、GM-CSF、IL-6/sIL-6R、IL-3、IL-1β、TNFα、IFNα及びIFNγ)特異的に活性化され、また、STAT3、STAT5a、STAT5b及びSTAT1がこれらのサイトカイン特異的にチロシンリン酸化されることを明らかにした。さらに、SCF、IL-6/sIL-6R及びG-CSFを用いて、STAT3のセリンリン酸化を詳細に解析すると、SCFはERK、IL-6/sIL-6RはH7感受性キナーゼ、G-CSFはERKとH7感受性キナーゼを介してSTAT3のセリンリン酸化を誘導していることが判明した。また、STAT3のセリンリン酸化はPI-3キナーゼによっても制御されていた。さらに、これらのサイトカインを用いて、CD34陽性細胞に対する増殖、生存及び細胞周期への導入を解析し、ERKとSTAT3の協調件用によりCD34陽性細胞の生存、細胞周期への導入及び増殖が相乗的に促進されることを明らかにした。これらの解析から正常ヒトCD34陽性細胞において特定のサイトカインにより活性化される細胞内シグナル伝達系の一覧表を作製することができた。これらの結果は、細胞株を用いて得られた結果とは多くの点で相違が認められ、正常細胞を用いた解析が白血病化の解明に極めて重要であることを示している。今後は、これらの結果を踏まえて、それぞれのシグナル伝達系の機能解析、細胞分化に伴うシグナル伝達系活性化の変化とその機能的役割、これらのシグナル伝達系のクロストークとその機能並びに骨髄性白血病芽球における異常を明らかにしたいと考えている。

使用正常人造血干细胞（CD34阳性细胞）的分析表明，特定的MAP激酶亚型级联（MEK-ERK，MKK3/6-P38和MKK4/7-JNK）是特异性活化激活的细胞因子（SCF，G-CSF，TPO，TPO，GM-CSF，GM-CSF，GM-CSF，IL-6/SIL-6/SIL-6/SIL-6/IFFN，IIL-13）和IFNγ）和STAT3，STAT5A，STAT5B和Stat1在这些细胞因子中特别磷酸化。此外，使用SCF，IL-6/SIL-6R和G-CSF对Stat3对STAT3的丝氨酸磷酸化的详细分析表明，SCF通过ERK，IL-6/SIL-6R，H7-敏感激酶，G-CSF诱导STAT3的丝氨酸磷酸化，以及G-CSF的STATASE 33-STESTER 37-sensens erk和H7-sensen。另外，STAT3的丝氨酸磷酸化也受PI-3激酶调节。此外，这些细胞因子被用来分析传播，生存和细胞周期转移到CD34阳性细胞，并揭示ERK和STAT3之间的合作可以协同促进CD34阳性细胞的存活，细胞周期转移和增殖。这些分析使我们能够创建由正常人CD34阳性细胞中特定细胞因子激活的细胞内信号传导系统的列表。这些结果在许多方面与使用细胞系获得的结果不同，表明使用正常细胞的分析对于阐明白血病极为重要。将来，我们想分析每个信号转导系统的功能分析，由于细胞分化及其功能作用，这些信号传输系统的串扰和功能而引起的信号转导系统激活的变化以及髓样白血病爆炸中的异常。

项目成果

Saeki, K., Kitagawa, S., Yuo, A.: "Diverse effects of cytochalasin B on priming and triggering the respiratory burst activity in human neutrophils and monocytes"Int.J.Hematol.. 74. 409-415 (2001)

Saeki, K.、Kitakawa, S.、Yuo, A.：“细胞松弛素 B 对启动和触发人类中性粒细胞和单核细胞呼吸爆发活动的多种影响”Int.J.Hematol.. 74. 409-415 (2001)

Suzuki, K., Hino, M., Kitagawa, S.: "Selective activation of p38 mitogen-activated protein kinase cascade in human neutrophils stimulated by IL-1β"J.Immunol.. 167. 5940-5947 (2001)

Suzuki, K.、Hino, M.、Kitakawa, S.：“IL-1β 刺激的人中性粒细胞中 p38 丝裂原激活蛋白激酶级联的选择性激活”J.Immunol.. 167. 5940-5947 (2001)

Aoyama, Y., Suzuki, K., Kitagawa, S.: "A novel cell surface antigen,4C8,is expressed on human eosinophils"Cytometry. (in press). (2002)

Aoyama, Y.、Suzuki, K.、Kitakawa, S.：“一种新型细胞表面抗原 4C8 在人嗜酸性粒细胞上表达”细胞计数。