造血細胞の細胞運動におけるMAPキナーゼとROCKの機能解析

MAP激酶和ROCK在造血细胞细胞运动中的功能分析

• 批准号: 16659257
• 负责人: 北川 誠一
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Osaka City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659257/
• 关键词: 好中球; GM-CSF; TNF-α; MAPキナーゼ; PI3キナーゼ; 運動性; ERK; p38; G-CSF; ランダム運動; CD18

顆粒球マクロファージコロニー刺激因子(GM-CSF)および腫瘍壊死因子(TNF-α)により誘導されるヒト好中球の細胞運動について解析した。好中球はGM-CSFおよびTNF-α刺激に反応して、それぞれ刺激2分および6分後から形態変化および運動性の亢進を示した。GM-CSF刺激では明らかな極性を示したが、TNF-α刺激では明らかな極性は認められず、強い接着と伸展が認められた。GM-CSF刺激による細胞の移動は距離が長く直線的であったが、TNF-α刺激による細胞の移動は距離が短く蛇行的であった。MEK阻害剤(U0126)により、GM-CSFおよびTNF-αによって誘導される偽足の形成と細胞の移動が阻害され、蛇行的運動が優位となった。p38 MAPK阻害剤(SB203580)により、GM-CSFによって誘導される偽足の形成と細胞の移動は影響を受けなかったが、細長い突起状または棒状の特徴的な尾部が形成され、手鏡様の形態を示した。一方、TNF-αで刺激した細胞では、伸展が強く阻害され、明らかな極性を示し、直線的な移動が優位となって、移動距離も長くなった。PI3K阻害剤(LY294002)により、GM-CSFで刺激した細胞では、偽足の形成とともに、多くの細胞がuropodを形成し、細胞移動が抑制された。一方、TNF-αで刺激した細胞では、伸展が阻害され、細胞の移動が亢進した。GM-CSFおよびTNF-αによって誘導される好中球の接着は、抗CD18中和抗体により強く阻害された。GM-CSFで刺激した細胞では、CD62Lが尾部に局在した。これらの結果は、GM-CSFおよびTNF-αが好中球に作用して、サイトカイン特異的に形態変化、接着、伸展および運動を誘導し、これらの応答にMEK/ERK、p38 MAPKおよびPI3Kが関与していることを示している。

分析了粒细胞巨噬细胞刺激因子（GM-CSF）和肿瘤坏死因子（TNF-α）诱导的人类嗜中性粒细胞的细胞运动。嗜中性粒细胞分别在刺激后2和6分钟对GM-CSF和TNF-α刺激的响应中显示出形态变化和运动性增加。尽管用GM-CSF刺激清楚地观察到了极性，但在TNF-α刺激中未观察到极性，但观察到较强的粘附和延伸。由GM-CSF引起的细胞迁移是长的，线性的，而TNF-α引起的细胞迁移却是短而弯曲的。 MEK抑制剂（U0126）抑制了GM-CSF和TNF-α诱导的伪足和细胞迁移的形成，从而导致蜿蜒的运动。 p38 MAPK抑制剂（SB203580）不影响GM-CSF诱导的伪足和细胞迁移的形成，而是形成一个特征性的尾巴，伸长或类似杆状，表现出手工样本的形态。另一方面，在用TNF-α刺激的细胞中，延伸受到强烈抑制，显示出明显的极性，线性运动占主导地位，并且旅行距离也增加了。在用GM-CSF刺激的细胞中，许多细胞形成尿ro的细胞，并且在GM-CSF刺激的细胞中抑制了细胞迁移。另一方面，用TNF-α刺激细胞会抑制延伸并增加细胞迁移。 GM-CSF和TNF-α诱导的中性粒细胞粘附受到抗CD18中和抗体的强烈抑制。在用GM-CSF刺激的细胞中，CD62L位于尾部。这些结果表明，GM-CSF和TNF-α作用于中性粒细胞，以诱导细胞因子特异性的形态学变化，粘附，扩展和运动，并且MEK/ERK，p38 MAPK和PI3K参与了这些反应。

项目成果

Type I and type II interferons delay human neutrophil apoptosis via activation of STAT3 and up-regulation of cellular inhibitor of apoptosis 2

• DOI: 10.1189/jlb.1104690
• 发表时间: 2005-07-01
• 期刊: JOURNAL OF LEUKOCYTE BIOLOGY
• 影响因子: 5.5
• 作者: Sakamoto, E;Hato, F;Kitagawa, S
• 通讯作者: Kitagawa, S