造血前駆細胞のアポトーシスを制御する新規細胞死誘導因子Bimβの機能解析

控制造血祖细胞凋亡的新型细胞死亡诱导因子 Bimβ 的功能分析

• 批准号: 13016214
• 负责人: 稲葉 俊哉
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13016214/
• 关键词: 遺伝子; 癌; アポトーシス; シグナル伝達; 発生・分化

造血前駆細胞の生存維持システムの異常は白血病の発症に直接・間接に関与するという立場から、当研究費では特にBcl-2スーパーファミリーに属するBimやその関連因子Bimβに焦点を当て研究をおこなった。BimはBH3細胞死誘導因子のメンバーであり、サイトカインによってその発現が抑制される。またBim欠損マウスは慢性骨髄性白血病(CML)様の症状を示すことから、われわれはBimのCML発症に対する関与を検討した。Bimはサイトカイン受容体からの古典的なRas/Raf/MAPK経路と、Ras/PI3-K/mTOR経路の双方により発現が制御されているが、Bcr-Ablは双方の経路を活性化することが知られているため、このキメラがBimの発現を抑制する可能性を検討した。Bcr-Ablをサイトカイン依存性細胞内で強制発現させるとサイトカイン非存在下でも細胞は増殖を続け、この際Bimの発現はほぼ完全に抑制された。ヒトCMLの急性転化由来細胞株やPh^1染色体陽性ALL由来細胞株ではPh^1染色体陰性AMLやALLに比べてBimの発現が抑制されていた。またこれらの細胞に対し、Abl特異的チロシンキナーゼ阻害剤STI571を用いてアポトーシスを誘導したところ、Bimの発現誘導が認められた。またCMLを必発するBcr-Ablトランスジェニックマウスを用いた検討を行った。このマウスは寛徐にCMLに酷似した症状を呈するモデルマウスである。正常マウス由来の骨髄細胞をサイトカイン存在下で短期培養し、幼若な造血前駆細胞を単離しサイトカイン非存在下で培養すると速やかにアポトーシスを起こすが、この際Bimの発現が誘導された。方、Bcr-Ablトランスジェニックマウス由来の細胞はサイトカイン除去によるアポトーシスに抵抗するが、この際Bimの発現誘導は抑制されていた。以上の結果よりBcr-AblによるCML発症にBimの発現抑制が関与している可能性が示された。

从造血祖细胞生存维持系统的异常直接或间接参与白血病的发生发展的角度来看，本次研究经费重点关注Bcl-2超家族成员Bim及其相关因子Bimβ。 Bim是BH3细胞死亡诱导因子的成员，其表达受到细胞因子的抑制。此外，由于 Bim 缺陷小鼠表现出与慢性粒细胞白血病 (CML) 相似的症状，因此我们研究了 Bim 在 CML 发展中的作用。 Bim 的表达受细胞因子受体的经典 Ras/Raf/MAPK 途径和 Ras/PI3-K/mTOR 途径控制，但 Bcr-Abl 可以激活这两种途径，因为这是已知的，我们研究了这种可能性。嵌合体抑制 Bim 表达。当Bcr-Abl被迫在细胞因子依赖性细胞中表达时，即使在没有细胞因子的情况下，细胞仍继续增殖，并且Bim表达几乎完全被抑制。与 Ph^1 染色体阴性 AML 和 ALL 相比，Bim 表达在人 CML 急变细胞系和 Ph^1 染色体阳性 ALL 衍生细胞系中受到抑制。此外，当使用 Abl 特异性酪氨酸激酶抑制剂 STI571 诱导这些细胞凋亡时，Bim 表达也被诱导。我们还使用不可避免地发展为 CML 的 Bcr-Abl 转基因小鼠进行了研究。这只小鼠是一只模型小鼠，它慢慢地表现出与 CML 非常相似的症状。正常小鼠的骨髓细胞在细胞因子存在的情况下进行短期培养，当分离出年轻的造血祖细胞并在没有细胞因子的情况下培养时，它们迅速发生凋亡，此时Bim的表达被诱导。另一方面，源自Bcr-Abl转基因小鼠的细胞由于细胞因子的去除而抵抗细胞凋亡，但Bim表达的诱导受到抑制。上述结果表明Bim表达的抑制可能参与了Bcr-Abl诱导的CML的发生发展。