ヌードマウス可移植性多剤耐性ヒト腫瘍細胞株を用いた抗腫瘍薬剤耐性克服に関する研究

裸鼠移植多重耐药人肿瘤细胞系克服抗肿瘤耐药性的研究

• 批准号: 01015037
• 负责人: 大野 竜三
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01015037/
• 关键词: 多剤耐性; 薬剤耐性; mdr1; 白血病細胞株; ヌードマウス; 多剤耐性遺伝子

がんにおける薬剤耐性の最も重要な機序の一つとして、多剤耐性遺伝子とその遺伝子産物であるpーglycoprotーeinの存在が明らかとなり、これらを標的とする薬剤耐性の克服の可能性が研究されている。我々は自ら樹立した2種のヒト急性白血病細胞培養株(NCOー2、NOMOー1)において、adriamycin(ADR)との低濃度接触から開始し、徐々に濃度をあげることにより同剤に100〜300倍耐性株NCOー2/ADRとNOMOー1/ADR株を分離した。両株ともに、ADRのみならず、他のanthracyclinesやpodophylotoxins、vinca alkaloids、mitoxantrone、actinomycinーD等に交差耐性を示したが、アルキル化剤や代謝拮抗剤とは交差耐性を示さなかった。両株とも多剤耐性遺伝子mdr1が増幅し、pーglycoproteinを細胞表面上に強く表現していた。一般にヒト白血病細胞株はヌードマウスに移植困難であるが、両株はそれらの親株ともどもヌードマウス可移植性であり、世界で最初のヌードマウス可移植性多剤耐性ヒト白血病細胞株となった。ヌードマウスで継代移植可能となった両株ともにmdr1遺伝子のDNAおよびmRNAおよびpーglycoprotein表現は耐性親株とほぼ同一であり、in vitroとin vivoの対応は十分であった。NCOー2およびNCOー2/ADR1×10^7をヌードマウスの皮下に移植し、1,5,9日後に、各種抗がん剤の至適量を静注投与した所、NCOー2/ADRにはADRには無効であったが、topoisomeraseーI阻害剤であるcamptothecin誘導体CPTー11や植物抽出新抗がん剤MSTー16とうは効果を示し、ADR耐性腫瘍にこれらの新開発抗がん剤はin vivoでも有効であることを示した。

多药耐药基因及其基因产物p-糖蛋白的存在已被揭示为癌症耐药性的最重要机制之一，并且通过针对这些基因的研究有可能克服耐药性。在我们自己建立的两种类型的人急性白血病细胞培养系（NCO-2和NOMO-1）中，我们从低浓度接触阿霉素（ADR）开始，并逐渐将浓度提高到相同药物的100％至100％。我们分离出300倍耐药菌株NCO-2/ADR和NOMO-1/ADR。两株菌株不仅对ADR表现出交叉耐药性，而且对其他蒽环类药物、鬼臼毒素、长春花生物碱、米托蒽醌、放线菌素-D等均表现出交叉耐药性，但对烷化剂或抗代谢药没有交叉耐药性。在这两种菌株中，多药耐药基因 mdr1 均被扩增，p-糖蛋白在细胞表面强烈表达。人白血病细胞系一般很难移植到裸鼠体内，但这两个细胞系及其亲本系都可以移植到裸鼠体内，这使它们成为世界上第一个可以移植到裸鼠体内的多重耐药人白血病细胞系。能够传代移植到裸鼠体内的两株菌株的mdr1基因的DNA和mRNA以及p-糖蛋白的表达量与耐药亲本菌株几乎相同，并且体外与菌株之间有足够的对应性。体内。将NCO-2和NCO-2/ADR1×10^7皮下植入裸鼠体内，1、5、9天后静脉注射各种抗癌药物最佳剂量对ADR无效。其中，喜树碱衍生物CPT-11、拓扑异构酶-I抑制剂和新型植物提取抗癌药物MST-16已显示出疗效，并且这些新开发的抗癌药物已被证明对ADR耐药肿瘤有效。它也被证明在体内有效。

项目成果

Ryuzo Ohno: "Recent progress in the treatment of adult acute levkemia." Acta Haewatol Jpn.52. 1287-1293 (1989)

Ryuzo Ohno：“成人急性白血病治疗的最新进展。”

Yoshinori Ito: "Increased P-glycoprotein expression and multidrugnesistant gene(mdr1)amplification are infrequently found in fresh acute leukemia cells-sequential analysis of 15 cases at initial presentation and relapsed stage." Cancer. 63. 1534-1538 (198

Yoshinori Ito：“在新鲜的急性白血病细胞中很少发现 P-糖蛋白表达增加和多药耐药基因 (mdr1) 扩增——对 15 例初发和复发阶段的病例进行序贯分析。”

Yasuo Morishima: "Low incidence of acute graft-rersus-nost disease by the administation of methotrexate and cyclosporine in Japanese leukemia patients after bone marrow transplantation from human leukocyte antigen compatible siblings;possible role of gene

Yasuo Morishima：“日本白血病患者在从人类白细胞抗原相容的兄弟姐妹进行骨髓移植后，使用甲氨蝶呤和环孢菌素，急性移植物反流病的发生率较低；基因的可能作用

Ryuzo Ohno: "Intensitied induction therapy with benenoyl cytosine arabinoside,dauhorubicin,6-mercaptopurine and prenisolone(BHACーDMP(II))therapy for acute myelogenous leukemia in adults and prognostic factors related to remission duration." Acta Haematol

Ryuzo Ohno：“使用苯甲酰胞嘧啶阿糖苷、柔红霉素、6-巯基嘌呤和泼尼松龙 (BHAC-DMP(II)) 强化诱导治疗成人急性髓性白血病以及与缓解持续时间相关的预后因素。”