頭頸部癌における治療抵抗性因子の解析

头颈癌治疗抵抗因素分析

基本信息

批准号：
22792026
负责人：
堂東亮輔
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Matsumoto Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2010
资助国家：
日本
起止时间：
2010-04-01 至 2013-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22792026/
关键词：
ABC transporter MDR1 MRP GST 多剤耐性獲得薬剤耐性機構薬剤排泄機構 ABCtransporter

项目摘要

抗癌剤耐性を獲得する機序のうち、薬物を細胞内から細胞外へ排出するATP依存性トランスポーター(ATP-binding cassette transporter :ABC transporter)であるmultidrug resistance gene(MDR)-1、multidrug resistance-associated protein(MRP)および解毒機構に関与するglutathione-S-transferase(GST)が唾液腺癌の抗癌剤多剤耐性獲得に関与するか明らかにすることを目的とした.ヒト口腔扁平上皮癌由来細胞株としてSCC-TM、ヒト唾液腺癌由来細胞株としてHSGおよびHSYを用いた.ビンクリスチン(VCR),パクリタキセル(TXL),ドキソルビシン(DOX),ドセタキセル(DOC),フルオロウラシル(5-FU),シスプラチン(CDDP)に対する薬剤感受性と各種抗癌剤処理による交差耐性は50%増殖抑制濃度(IC50)で比較した.各種抗癌剤で処理した培養細胞におけるABC transporterとGSTの遺伝子発現はreal-time PCRで検討し,蛋白の発現はWestern blot法で同定した.発現誘導されたGST-pi/MRPの機能は,GST-pi/MRP高発現細胞株に対してMRP阻害剤とGST阻害剤を処理して薬剤感受性の変化で検討した.唾液腺癌由来HSGおよびHSYの各種抗癌剤に対するIC50は口腔扁平上皮癌細胞由来SCC-TMに比べ有意(p<0.05)に高値を示した.唾液腺癌培養細胞に対してVCR,DOX,DOCを反復処理するとMDR1,MRP1,GST-piの遺伝子が増幅され,蛋白の発現も増加した.GST-pi/MRPを高発現した唾液腺癌細胞のIC50は,MRP阻害薬とGST阻害薬によって有意(p<0.05)に低下した.唾液腺癌細胞の抗癌剤感受性はMDR1の他に,GST-piによる基質複合体形成の触媒とMRPによる薬剤排泄機構の亢進が原因であると考えられた.

在获得抗癌耐药性的机制中，与多药耐药性相关的多药耐药基因（MDR）-1是一种ATP依赖性转运蛋白（ATP结合盒转运蛋白：ABC转运蛋白），将药物从细胞内分泌到细胞外。。本研究的目的是利用HSG和HSY作为人类，阐明参与解毒机制的谷胱甘肽-S-转移酶（GST）是否参与唾液腺癌-TM抗癌药物多药耐药性的获得。唾液腺癌衍生的细胞系。对癌症克里斯汀 (VCR)、紫杉醇 (TXL)、阿霉素 (DOX)、多西紫杉醇 (DOC)、氟尿嘧啶 (5-FU) 和顺铂 (CDDP) 的药物敏感性以及由于使用各种抗癌药物治疗而产生的交叉耐药性由下式确定：用各种抗癌药物处理的培养细胞中的 50% 生长抑制浓度 (IC50) ABC。使用实时 PCR 检查转运蛋白和 GST 基因表达，并使用 Western 测定蛋白质表达通过用 MRP 抑制剂和 GST 抑制剂处理具有高 GST-pi/MRP 表达的细胞系，并观察来自唾液的 HSG 和 HSY 的药物敏感性变化，研究了诱导的 GST-pi/MRP 的功能。腺癌对各种抗癌药物的抵抗力显着高于源自口腔鳞状细胞癌细胞的SCC-TM（p<0.05）。重复处理扩增了MDR1、MRP1和GST-pi基因并增加了蛋白表达。高表达GST-pi/MRP的唾液腺癌细胞的IC50为因此，除了MDR1之外，唾液腺癌细胞对抗癌药物的敏感性被认为是由于GST-pi催化底物复合物形成以及MRP增强药物排泄机制所致。