レチノイン酸による白血病の分化誘導療法と分化機構の分子生物学的解明

视黄酸诱导白血病分化治疗及其分化机制的分子生物学阐明

• 批准号: 04152059
• 负责人: 大野 竜三
• 金额: $ 2.37万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04152059/
• 关键词: レチノイン酸; 白血病; 分化誘導療法; レチノイン酸受容体; RAR遺伝子; PML遺伝子; 分子生物学; 急性前骨髄性白血病

[目的]急性前骨髄球性白血病(APL)におけるPML、RAR遺伝子間の再配列と、その臨床的意義を解析する。またAll-trans retinoic acid(ATRA)の分化誘導機序の解明を行う。[成果]1)40例のAPL細胞を対象とし、RAR遺伝子cDNAおよび5'PML、3'PMLcDNAをプローブとしてサザンハイブリダイザーションを行った。RAR遺伝子切断は全例イントロン2で起きていた。PML遺伝子切断点はイントロン3、イントロン5周辺からエクソン6イントロン6の2箇所に集中していた。PML再配列を認めた36例中3'側切断は28例、5'側切断は8例であった。PML遺伝子切断部位の相違と、病像やATRAに対する反応性の間には差を認めなかった2)PML遺伝子切断部位により、PML/RARキメラ転写物の構造が異なった。RT-PCRによる残存腫瘍の検出をプロスペクティブに行った。感度は、10^<-5>で、治療開始4カ月目に残存腫瘍が検出不能となった6例では、全例1年以上寛解を持続しているが、検出された3症例ではすべて1年以内に再発した。3)サイトカインとATRA存在下で、新鮮APL細胞の軟寒天培養を行い、APL細胞コロニーの分化が確認された。[所見]1)日本におけるAPLのPML,RAR遺伝子再配列は、欧米に比しPML遺伝子下流切断が多いことが特徴と考えられた。PML遺伝子切断部多様性の臨床的意義は認められなかった。2)APLの微量残存腫瘍の検出が可能があり、地固め、強化療法の有効性を確認できた。APLのプロスペクティブスタディの結果、残存腫瘍の減少と予後には相関が認められた。

[目的]分析急性早幼粒细胞白血病（APL）中PML和RAR基因重排及其临床意义。我们还将阐明全反式维甲酸（ATRA）的分化诱导机制。 [结果] 1)以RAR基因cDNA和5'PML、3'PML cDNA为探针，对40个APL细胞进行Southern杂交。在所有情况下，RAR 基因裂解均发生在内含子 2 中。 PML基因断点集中在两个位置，从内含子3和内含子5周围到外显子6和内含子6。在观察到PML重排的36例中，28例有3'截短，8例有5'截短。在PML基因裂解位点和疾病图像或对ATRA的反应性之间没有观察到差异。2)PML/RAR嵌合体转录物的结构根据PML基因裂解位点而不同。通过 RT-PCR 前瞻性地进行残留肿瘤检测。敏感性为10^<-5>，在开始治疗4个月后无法检测到残留肿瘤的6例中，全部保持缓解超过1年，但在检测到残留肿瘤的3例中，均1年内复发。 3)将新鲜的APL细胞在细胞因子和ATRA存在下在软琼脂上培养，并确认APL细胞集落的分化。 [研究结果] 1）日本APL的PML和RAR基因重排被认为比欧美有更多的PML基因下游截短。未观察到 PML 基因断裂多样性的临床意义。 2）在APL中能够检测到少量残留肿瘤，证实了巩固和强化治疗的有效性。 APL 的一项前瞻性研究显示残余肿瘤大小的减小与预后之间存在相关性。

项目成果

R.Ohno: "Randomized study of individualized induction therapy with or without VCR,and of 4 or 12 courses in adult AML:JALSG-AML87" Leukemia. 2. 92-95 (1992)

R.Ohno：“成人 AML 个体化诱导治疗（有或没有 VCR）以及 4 或 12 个疗程的随机研究：JALSG-AML87”白血病。

Hitoshi Kiyoi: "Characterization of the immunoglobulin heavy chain complementarity determining regon(CDR)-III sequences from human B cell precursor acute lymphoblastic leukemia cells." J Clin Invest. 89. 739-746 (1992)

Hitoshi Kiyoi：“人 B 细胞前体急性淋巴细胞白血病细胞的免疫球蛋白重链互补决定区 (CDR)-III 序列的表征。”

Y.Itoh: "All-trans-retinoic acid induced enrichment of functionally normal neutrophils in vivo in a patient with acute promyelocytic leukemia." Leukemia. 6. 806-808 (1992)

Y.Itoh：“全反式视黄酸在急性早幼粒细胞白血病患者体内诱导功能正常的中性粒细胞富集。”

H.Ohashi: "Remission induction of acute promyelocytic leukemia by all-transretinoic acid:molecular evidence of restoration of normal hematopoiesis after differentiation and subsequent extinction of leukemic clone." Leukemia. 6. 859-862 (1992)

H.Ohashi：“全反式维甲酸诱导急性早幼粒细胞白血病缓解：白血病克隆分化和随后消亡后恢复正常造血功能的分子证据。”