消化器癌におけるDNA修復異常と抗癌剤感受性との関連の解明および化学療法への応用

胃肠癌DNA修复异常与抗癌药物敏感性关系的阐明及其在化疗中的应用

基本信息

批准号：
12217111
负责人：
前原喜彦
金额：
$ 3.26万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、DNA修復異常と抗癌剤感受性との関連を解明するため、まず消化器癌で汎用されている5-FUに注目し、ミスマッチ修復異常との関連、およびマイクロサテライト不安定性解析の意義を検討した。ミスマッチ修復能の判明している種々の大腸癌細胞株を用いて、5-FU感受性とミスマッチ修復能との関連について解析した。この際、5-FUによる細胞のDNA障害に対しG1/SチェックポイントでのDNA修復かアポトーシスによる細胞死を選択するp53の発現や、5-FU感受性の主要酵素であるチミジル酸合成酵素(TS)の活性や発現、5-FUによるRNA障害や細胞周期の変化など詳細な検討を加え5-FU感受性におけるミスマッチ修復能の意義を考察した。その結果、p53は細胞周期の変化には関与しているが直接感受性を規定するものではないこと、TSがほぼ抑制されている状態では、ミスマッチ修復異常細胞はミスマッチ修復正常細胞より5-FU感受性が低いことが明らかとなった。今後の方針として、ミスマッチ修復遺伝子MSH2のノックアウトマウス由来の繊維芽細胞を用いての5-FU感受性の解析を行ない、MSH2欠損の感受性に及ぼす影響及びそのメカニズムを解析する予定である。臨床検体での解析系では、ミスマッチ修復異常の評価のためのより客観的なマイクロサテライト不安定性解析法を開発しており(S.Oda,et al.Nucleic Acids Res 25;3415-3420,1997)臨床症例は、胃癌、大腸癌で各々100症例以上解析した。マイクロサテライト不安定検査陽性は、胃癌20%、大腸癌40%であった。今後はマイクロサテライト不安定性により評価した各症例のミスマッチ修復異常と抗癌剤感受性試験での5-FU感受性、更に臨床効果との相関を検討していきたいと考える。

在这项研究中，为了阐明DNA修复异常与抗癌药物敏感性之间的关系，我们首先专注于5-FU，该5-FU通常用于消化癌，并检查了不匹配修复异常和微卫星不稳定性分析的重要性之间的关系。各种具有已知能力修复不匹配能力的结肠癌细胞系用于分析5-FU敏感性和修复错配的能力之间的关联。在这项研究中，我们研究了不匹配修复能力在5-FU敏感性中的重要性，包括p53的表达，p53在G1/s检查点或由于凋亡引起的DNA修复或细胞死亡，以及胸苷基合酶（TS）的活性和表达，对5-FU损伤的主要酶构成5-FU的症状，以及对5-FU造成的效果的敏感性，以及5-FU的显着效果，以及5-F的显着效果，以及5-F的显着变化，并在5-FU上变化。灵敏度。结果表明，p53参与细胞周期的变化，但并未直接定义灵敏度，并且在几乎抑制TS的状态下，错配修复异常细胞对5-FU的敏感性不如错配修复正常细胞敏感。作为未来的政策，我们将使用源自不匹配修复基因MSH2的基因敲除小鼠的成纤维细胞分析5-FU敏感性，并分析对MSH2缺乏症及其机制易感性的影响。在临床标本分析系统中，已经开发了一种更客观的微卫星不稳定性分析方法来评估错配修复异常（S.oda等人，核酸res 25; 3415-3420，1997），并分析了100多个临床病例的胃癌和胃癌。微卫星阳性不稳定测试是20％胃癌和40％结肠癌。将来，我们想研究通过微卫星不稳定性评估的每种情况下的不匹配修复异常之间的相关性，抗癌药物敏感性测试中的5-FU敏感性和临床效应。