マウス半数体精子細胞特異的に発現する遺伝子群の解析

小鼠单倍体精子细胞特异表达基因分析

• 批准号: 12024214
• 负责人: 田中 宏光
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12024214/
• 关键词: 半数体; 精子細胞; 特異的遺伝子; 精細胞; 精巣; ヒト; マウス; ゲノム

精細胞特異的cDNAクローニング(精細胞特異的抗体によるクローニング及び精巣全体から支持細胞を差し引くサブトラクションクローニング)によって精細胞にのみ発現し、他の組織では全く発現の見られない新規の遺伝子が多数存在する事も明らかになってきた。これらの我々が単離した個々の遺伝子についてはそれぞれの機能の解析を進めた。pAP-3ベクターを用いて行う我々のサブトラクションクローニング法では半数体精子細胞に特異的な発現の見られる遺伝子群のクローニングを効率良く行う事が出来、すでに多数のcDNAクローンを単離し、これらの遺伝子産物の精子細胞分化に果す役割を順次解析を行った。さらに残りの遺伝子についても解析中である。我々は、全cDNAを含むクローンを単離し、そのコードする産物の機能を解析する事をめざしているため、すべて完全長cDNAを単離したうえで解析を進めている。さらにこのライブラリーには既知の精細胞特異的遺伝子も多数含まれており、半数体精子細胞特異的遺伝子をほぼ網羅しているものと考えている。またcomputerに登録されたtestis EST libraryから各臓器のEST libraryをsubtractしgerm cell specific ESTのみを拾い上げ、我々のサブトラクションクローニングで得られた結果と比較してみると、testis ESTにのみ存在する半数体精子細胞特異的遺伝子はほとんど見つからず、我々のsubtraction cloningが如何に優れているかを示している。これらの遺伝子の解析から、半数体特異的遺伝子のゲノム構造がイントロンを含まないもしくは、単純な構造であること、今まで、半数体特異的遺伝子は少ないと考えられてきたが、かなり多く存在すること、ヒトにおいてもこれらマウスの相同遺伝子が機能していること、などが明らかとされた。今後も、さらに継続しこれら遺伝子の解析を網羅的に行っていきたい。

同样清楚的是，许多新型基因仅通过精子特异性cDNA克隆在精子细胞中表达（用精子特异性抗体和减去克隆的克隆，可以从整个睾丸中减去支撑细胞），并且在其他组织中均未表达。分析了我们分离的这些单个基因的功能。我们使用PAP-3载体的减法克隆方法可以有效地克隆特定于单倍体精子细胞的基因，并且已经分离出许多cDNA克隆，并且这些基因产物在精子细胞分化中的作用被顺序分析。此外，目前正在分析其余基因。我们的目标是隔离包含所有cDNA的克隆并分析编码它们的产品的功能，因此我们在分析它们之前将所有全长cDNA隔离。此外，该文库还包含许多已知的精子细胞特异性基因，并且被认为涵盖了几乎所有单倍体精子细胞特异性基因。此外，当我们从计算机上注册的睾丸EST库中减去每个器官的EST库时，我们仅拾取了生殖细胞特异性EST，并将其与从减法克隆中获得的结果进行了比较时，我们发现只有单倍体精子细胞特异性基因仅存在于睾丸中，表明我们的subtraction Cloning cloning scloning sestis calling sestis calling scloning sans ins testis est。对这些基因的分析表明，单倍体特异性基因的基因组结构不包含内含子或具有简单的结构，尽管人们认为到目前为止几乎没有单倍体特异性基因，但有很多基因，但这些小鼠中的这些同源基因在人类中也起作用。我们希望将来继续对这些基因进行全面分析。

项目成果

Minoru Koga: "Isolation and characterization of a haploid germ cell-specific novel complementary deoxyribonucleic adcid ; testis-specific homologue of succinyl CoA : 3-oxo acid CoA transferase."Biol.Reprod.. Vol.63. 1601-1609 (2000)

Minoru Koga：“单倍体生殖细胞特异性新型互补脱氧核糖核酸的分离和表征；琥珀酰 CoA 的睾丸特异性同源物：3-含氧酸 CoA 转移酶。”Biol.Reprod.. 第 63 卷。

Norikazu Yabuta: "Structure, expression, and chromosome mapping of LATS2, a mammalian homologue of the Drosophila tumor suppressor gene lats/warts."Genomics. Vol.63. 263-270 (2000)

Norikazu Yabuta：“LATS2 的结构、表达和染色体作图，LATS2 是果蝇肿瘤抑制基因 lats/warts 的哺乳动物同源物。”基因组学。

Yasuhide Yoshimura: "Nested genomic structure of haploid germ cell specific haspin gene."Gene. (In press). (2001)

Yasuhide Yoshimura：“单倍体生殖细胞特异性 haspin 基因的嵌套基因组结构。”基因。

Sami Ventela: "Expression of green fluorescent protein under beta-actin promoter in living spermatogenic cells of the mouse stage-specific regulation by FSH.."Int.J.Androl.. Vol.23. 236-242 (2000)

Sami Ventela：“FSH 阶段特异性调节小鼠活生精细胞中 β-肌动蛋白启动子下绿色荧光蛋白的表达。”Int.J.Androl.. 第 23 卷。

Kinya Uchida: "Cloning and characterization of a complementary deoxyribonucleic acid encoding haploid-specific alanine-rich acidic protein located on chromosome-X."Biol.Reprod.. Vol.63. 993-999 (2000)

Kinya Uchida：“编码位于 X 染色体上的单倍体特异性富含丙氨酸的酸性蛋白的互补脱氧核糖核酸的克隆和表征。”Biol.Reprod.. 第 63 卷。