神経再生に伴い出現する細胞接着因子フィブロネクチンの形態学的証明

随神经再生出现的细胞粘附因子纤连蛋白的形态学证据

基本信息

批准号：
62221017
负责人：
木村宏
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Shiga University of Medical Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Special Project Research
财政年份：
1987
资助国家：
日本
起止时间：
1987 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

イヌ血漿からフィブロネクチン(FN)を精製し, これに対する抗血清を家兎で作成した. 抗血清の検定を免疫電気泳動および酵素免疫測定法で行い高純度かつ抗力価であることを確認した. このFN抗血清を用いて, ラット脳を免疫組織化学的に検索した. まず成熟ラットで脳を無傷のまま飼育した場合, FN陽性反応は髄膜を除き脳実質には全く認められなかった. そこで実験モデルとして, 成熟ラット脳を開頭下に外科的切除術あるいは紫外線照射により大脳皮質損傷を与え, 再び縫合した. その術後の経過を日を追って各動物群で検索したところ, 術後30分という短時間ですでに術部位に限局したFN陽性反応が認められた. しかし, その反応はび慢性が主体であることから, 恐らく血管透過性が高まったため血中のFNが脳実質に浸潤したものと思われた. 術後3日目では, このような浸潤性のFNは次第に減少したが, 代わりに神経細胞の多数およびグリア細胞の少数が皮質損傷部に一致して認められた. ここで重要な所見は, FN免疫陽性神経細胞の軸索内にも反応が出現し, 皮質下へ投射する経路に沿って観察されたことである. この皮質下投射領域におけるFN陽性反応は術后2週目頃に最強となり容易に観察されたが, もっと長日時で少なくとも8週頃までは観察可能であった. これらの皮質下領域としては, 視床・大脳脚・中脳被蓋および延髄錐体路であった. そこで, 最も術部から遠位にある延髄錐体(術側と同側)の陽性反応を免疫電顕的に検索した. 反応産物は有髄線維の軸索に一致して認められたが, その多くは, 度の差はあるものの退行性変化を一過性に受けその後再生に転じたと思われる像を呈していた. 以上の結果から, 脳が損傷を受けると血管の透過性が高まり血中のFNが脳実質に浸潤する. ついで神経細胞とくに再生可能な程度の軽度損傷を受けたものがFNをとり込み, 軸索遠位へと輸送し再生過程に役立ている事が分った.

从狗血浆中纯化纤连蛋白(FN)，并在家兔体内制备抗血清，经免疫电泳和酶联免疫吸附测定，证实其具有高纯度和抗效力。首先，当成年大鼠在其大脑完整的情况下饲养时，除了脑膜之外，在脑实质中没有观察到FN阳性反应。成年大鼠大脑的大脑皮层因手术切除或开颅手术下紫外线照射而受损，重新缝合大脑时，我们逐日检查各组动物的进展情况，发现术后病程短至30。分钟内已观察到局限于手术部位的阳性 FN 反应，但由于反应主要是弥漫性的，因此认为血液中的 FN 可能是由于术后第三天血管通透性增加而渗入脑实质。天，这种浸润性FN逐渐减少，但在皮层病变中却观察到大量神经元和少量胶质细胞。这里的重要发现是，FN免疫阳性神经元的轴A反应也在束内出现，并且是沿着投射到皮质下的路线观察到。该皮质下投射区域的阳性FN反应在术后2周左右最强，并且很容易观察到。可以在较长的日照时间内进行观察，直到至少 8 周。这些皮层下区域包括丘脑、大脑脚、中脑被盖和髓质锥体束，用于寻找髓质锥体（手术同侧）的阳性反应。发现反应产物对应于有髓纤维的轴突，但大多数是虽然程度有所不同，但似乎是大脑发生了暂时的退行性变化，然后转向再生。从上述结果来看，当大脑受损时，血管的通透性增加，血液中的FN量减少。它渗透到脑实质。然后，FN 被神经元吸收，特别是那些已经轻度损伤足以再生的神经元，并被运输到远端轴突，在再生过程中发挥作用。