新しい癌血管新生因子angiopoietinファミリーのシグナル伝達制御による癌治療の試み

尝试通过控制新型癌症血管生成因子血管生成素家族的信号转导来治疗癌症

基本信息

批准号：
11877214
负责人：
田中真二
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11877214/
关键词：
Angiopoietin-2 Tie2 hepatocellular carcinoma angiogenesis hypervascularity in vivo electroporation gene therapy tumor dormancy

项目摘要

我々は新しい癌関連遺伝子として高度血管新生を示す肝癌組織に特異的に発現するangiopoietin-2をクローニングした。次にその機能解析のためangiopoietin-2高発現肝癌細胞株を作製した。angiopoietin-2高発現肝癌細胞株はin vitroではその細胞増殖に変化がなかったが、ヌードマウスに腹腔内投与すると腫瘍形成とともに全て3週間以内に出血死した(Tanaka et al.J Clin Invest,1999)。さらに特異的抗体による免疫組織化学的解析により蛋白質発現を調べると、angiopoietin-2蛋白は非癌部肝組織や高分化肝癌ではほとんど発現しないが、中・低分化肝癌の新生血管周囲の癌細胞に強く発現することがわかった(投稿中)。またangiopoietinファミリーの特異的レセプターであるTie2チロシンキナーゼのcDNAをLudwig癌研究所Stacker博士より分与を受け、その発現細胞Tie2-3T3を作製した。angiopoietin-2によりTie2-3T3細胞のTie2チロシンキナーゼは活性化されるが、Tie2のectodomain発現ベクターeTie2導入により抑制された。さらにマウス腫瘍モデルにおいてeTie2遺伝子をin vivo electroporationにより導入すると、その腫瘍形成は著しく抑制された(投稿準備中)。また、我々は癌組織で高発現する新たな血管新生関連遺伝子をクローニングし現在その解析が進行している(GenBank登録AB034122)。近年、癌血管新生の抑制はtumor dormancy(癌冬眠化)を誘導する新たな治療標的として注目を集めているが(Boehm et al.Nature 1997)、本研究により新たな癌治療のターゲット分子候補が解明され、極めて高い成果が得られた。

我们克隆了血管生成素-2，这是一种新的癌症相关基因，它在表现出高血管生成的肝癌组织中特异性表达。接下来，我们创建了高表达血管生成素2的肝癌细胞系来分析其功能。高表达angiopoietin-2的肝癌细胞系在体外没有表现出细胞增殖的变化，但当给裸鼠腹腔注射时，所有细胞在3周内形成肿瘤并死于出血(Tanaka et al. J Clin Invest, 1999)。此外，当使用特异性抗体通过免疫组织化学分析检查蛋白质表达时，血管生成素2蛋白在非癌性肝组织或高分化肝癌中几乎不表达，但在中分化和低分化肝癌中新生血管周围的癌细胞中表达发现表达强烈（目前正在发布）。我们还从路德维希癌症研究所的 Stacker 博士那里收到了 Tie2 酪氨酸激酶（血管生成素家族的一种特异性受体）的 cDNA，并创建了 Tie2-3T3 表达细胞。 Tie2-3T3 细胞中的 Tie2 酪氨酸激酶被血管生成素-2 激活，但通过引入 Tie2 胞外域表达载体 eTie2 被抑制。此外，当通过体内电穿孔将eTie2基因导入小鼠肿瘤模型时，肿瘤形成被显着抑制（准备提交）。此外，我们克隆了一个新的血管生成相关基因，该基因在癌组织中高表达，目前正在进行分析（GenBank注册AB034122）。近年来，抑制癌症血管生成作为诱导肿瘤休眠的新治疗靶点引起了人们的关注(Boehm et al.Nature 1997)，这项研究为癌症治疗确定了新的靶分子候选物，这一问题得到了澄清并极高。得到了结果。