樹状突起スパインの神経防御機能の検証

树突棘神经保护功能的验证

基本信息

批准号：
11157204
负责人：
林謙介
金额：
$ 0.83万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11157204/
关键词：
細胞性粘菌分化誘導因子神経細胞初代培養細胞死細胞毒性

项目摘要

DIFは細胞性粘菌において柄細胞への分化を誘導する因子である。近年、DIFが哺乳動物の腫瘍細胞に対して細胞増殖抑制、分化誘導、アポトーシス誘導などの作用を持つことが報告されている。我々はラット大脳皮質の初代培養神経細胞に対するDIFの効果について調べた。1.神経細胞に対しても分化促進効果があるかを調べるために、各種の分化マーカの発現を、RT-PCRで調べたが分化促進の効果は認められなかった。2.成熟した神経細胞にDIFを与えると樹状突起の数珠状化や細胞体の膨張などの細胞変性が見られた。培養初期の未成熟な細胞に対しては高濃度(20μM)、数日間でも無効だったが、培養3週目の神経細胞では低濃度(無血清培地では5μM,血清培地では10μM)、2時間で形態異常が見られた。3.DIFによる変性が過剰なカルシウム流入によるものである可能性を考え、細胞内カルシウム濃度変化を調べた。無血清培地において、5μMのDIFを与えても細胞内カルシウムは自発的な濃度上昇のレベル以上には上がらなかった。4.DIFによるimmediate early geneの発現誘導を調べた。培養3週目の神経細胞に5μMのDIFを2時間作用させるとc-fosの発現が上昇したが、zif/268やarcの発現に影響はなかった。10μM picrotoxinではすべての発現が上昇した。5.DIFによる神経細胞からのNO放出を調べた。5μMのDIFによってNO放出の上昇を認めた。以上のことからDIFは神経細胞に過興奮をおこさせることなく細胞変性を誘発すること、それがNOを介している可能性が示唆された。

DIF是诱导细胞载体细菌中分化为模式细胞的因素。近年来，据报道，DIF具有哺乳动物肿瘤细胞的作用，例如细胞繁殖，分化诱导和凋亡诱导。我们检查了DIF对大鼠大脑皮质的第一个代培养物的作用。 1。为了检查神经细胞是否具有分化促进效应，通过RT-PCR检查了各种分化标记的表达，但未观察到分化促进的作用。 2。给予成熟的神经细胞显示细胞变性，例如树突的念珠和细胞体的膨胀。在培养的早期，未成熟细胞的高浓度（20μM）无效几天，但在培养的第三周，神经细胞的低浓度（在血清中为5μm，血清培养基为10μm），2小时以异常形式看到。 3。考虑到DIF引起的变性可能是由于钙流入过多引起的，因此检查了内部钙浓度。在无血清的土地中，即使使用5μMDIV，内部钙也没有升高至自发浓度的水平。 4。我通过dif检查了模仿地球基因的诱导。 5μMDIV对培养的第三周的影响增加了C-FOS的表达，但不影响ZIF/268或ARC的表达。在10μm的picrototoxin中，所有表达式上升。 5。检查了通过DIF从神经细胞中释放NO。 5μMDIF允许不释放升高。以上表明DIF会触发细胞变性而不会过度标记神经细胞，这可能是通过NO。