ヒト造血幹細胞の解析と白血病発症機構の研究

人类造血干细胞分析及白血病发病机制研究

基本信息

批准号：
11139215
负责人：
中畑龍俊
金额：
$ 3.2万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

G-CSFRからの細胞増殖シグナル伝達には、細胞内領域のbox1,box2をふくむN端側が、分化シグナル伝達にはN末端とC末端の両者が必要であることが報告されている.先天性好中球減少症であるKostmann症候群の一部の患者ではG-CSFR遺伝子の変異によりG-CSFRの細胞内領域のC末端の欠失が見られ、これが患者で見られる好中球系前駆細胞の成熟障害の直接的原因であろうと考えられている。近年、G-CSFを長期使用されているKostmann症候群患者にMDSや急性白血病が高頻度に合併することが明らかとなり、G-CSFRの変異と急性白血病発症との関係が注目されるとともに臨床的に大きな問題となっている。本研究ではwild typeおよびC末端を欠失した変異G-CSFRを発現するTgマウスを作製し、変異G-CSFRを有する個体へのG-CSFの長期投与が急性白血病発症の原因となるか否か検討することを主目的としている。また、G-CSFRを介する刺激による造血幹細胞の増殖・分化過程を検討すると共に、2種類のG-CSFRからの細胞内シグナル伝達の違いを明らかにし、白血病発症との関係を解析することを目的としている。Wild typcおよびKostmann症候群患者で見られるG-CSF受容体(G-CSFR)遺伝子のmutationを持ち、C末端を欠失した2種類の変異G-CSFRトランスジェニック(Tg)マウスを作成した。Wild typeのG-CSFR Tgマウスにおいて、末梢血中の血球数に変化はなく、G-CSFは骨髄細胞から好中球、マクロファージ、好酸球、巨核球、肥満細胞、芽球など様々な細胞の増殖・分化・成熟を刺激した.このようなG-CSFの作用はclone-sortingした細胞の単細胞培養でも確認された。以上の結果より、血球分化におけるサイトカイン受容体シグナルの特異性は極めて低いことが示唆された。Kostmann症候群患者で見られるG-CSFR遺伝子のmutationを持ち、C末端を欠失した2種類の変異G-CSFR-Tgマウスの作成に成功した.いずれにおいても著明な好中球減少が見られており、世界で始めてKostmann症候群のモデルマウスが作成できたと考えられる。現在、好中球減少機序の詳細な検討及びこれらのマウスへのhG-CSFのin vivo投与により、白血病、MDSが惹起されるか否か検討している。

据报道，G-CSFR的细胞增殖信号传递需要N端，包括细胞内区域box1和box2，而分化信号传递则需要N端和C端，且中性粒细胞减少。在一些斯特曼综合征患者中，G-CSFR 基因突变导致 G-CSFR 细胞内区域 C 末端缺失，这直接导致这些患者中性粒细胞祖细胞的成熟受损。以为会的。近年来，已明确长期使用G-CSF的Kostmann综合征患者易发生MDS和急性白血病，G-CSFR突变与急性白血病发病的关系引起关注。这已经成为临床上的一个大问题。在这项研究中，我们生成了表达野生型和缺乏C末端的突变型G-CSFR的Tg小鼠，并研究了对具有突变型G-CSFR的个体长期施用G-CSF是否会导致急性白血病的发生作为主要目的。是要考虑是否此外，我们的目的是检查G-CSFR介导的刺激引起的造血干细胞的增殖和分化过程，阐明两种类型的G-CSFR的细胞内信号传递的差异，并分析与白血病发展的关系。据说我们创建了两种类型的突变型 G-CSFR 转基因 (Tg) 小鼠，它们的 G-CSF 受体 (G-CSFR) 基因在野生型和科斯特曼综合征患者中发现有突变，并且缺乏 C 末端。野生型G-CSFR在Tg小鼠中，外周血中的血细胞数量没有变化，而G-CSF存在于骨髓细胞、中性粒细胞、巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、巨核细胞、肥大细胞、 G-CSF 的这种作用也在克隆分选细胞的单细胞培养物中得到证实。上述结果表明细胞因子受体信号在血细胞分化中的特异性极低。我们成功培育出两种类型的突变型 G-CSFR-Tg 小鼠，这两种小鼠均具有在科斯特曼综合征患者中观察到的 G-CSFR 基因突变，并且缺乏 C 末端，这被认为是世界上首例。科斯特曼综合征小鼠模型已经建立。我们目前正在详细研究中性粒细胞减少症的机制，并研究向这些小鼠体内施用hG-CSF是否会诱发白血病和MDS。