神経節初代培養細胞とT細胞の共存培養とその機能解析

原代培养神经节细胞与T细胞的共培养及其功能分析

基本信息

批准号：
10877358
负责人：
中西守
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Nagoya City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

免疫系と神経系は生体内の独立したシステムのように考えられてきた。しかし、免疫学や神経生物学の急速な進歩は、免疫系と神経系との間には密接な相互作用が存在し、生体の恒常性の維持に働いていると推察されるようになった。これは、いわば、免疫系が環境変化に対するアンテナの役割を果たし、環境情報を神経中枢に伝達する一方、中枢からは免疫系への制御が働いていることを示している。しかし、このようなクロストークの実体については、適切な研究手段がなく、これまでほとんど研究がなされてこなかった。そこで、本研究では、免疫系と神経系との相互作用を解明するため、神経節初代培養細胞とT細胞の共存培養システムの開発に取り組んだ。そして、T細胞ハイブリドーマと神経節初代細胞培養の共存培養システムの確率に成功した。次いで、共焦点レーザ顕微鏡を用いて共存培養システムでの免疫細胞(T細胞)と神経細胞のクロストークの機能解析をカルシウムシグナルに着目して行った。サソリ毒で神経細胞を特異的に活性化すると、神経突起のカルシウムイオン濃度が上昇するとともに、数秒のラグタイムの後に、神経突起と接着しているT細胞のカルシウムイオン濃度が大きく上昇した。このようなT細胞のカルシウムイオン濃度の上昇は神経突起と接着していないT細胞では観測されなかった。次に、神経突起からT細胞のカルシウムシグナルの伝達を因子の同定を行った。βアドレナリン受容体に対するアンタゴニストの存在下で神経細胞を刺激したところ、アンタゴニストの濃度依存的にT細胞のカルシウムイオン濃度上昇が抑制された。また、αアドレナリン受容体のアンタゴニストではT細胞のカルシウムイオン濃度上昇は抑制されなかった。これらの結果は、ノルアドネラリンがβアドネラリン受容体を介して、T細胞の活性化に関与していることを世界に先駆けて明らかにした。

免疫系统和神经系统被认为是活体中的独立系统。但是，已经假定免疫学和神经镜的快速发展，它在免疫系统和神经系统之间具有可互换的相互作用，并且正在努力维护生物的家园。这表明免疫系统对环境变化具有天线，将环境信息传输到神经中心，而对免疫系统的控制正在起作用。但是，对于此类交叉讲话，没有适当的研究，到目前为止，很少进行研究。因此，在这项研究中，我们开发了第一代培养细胞和T细胞之间共存培养系统的发展，以阐明免疫系统与神经系统之间的相互作用。他成功地取得了T细胞杂交瘤和海军淋巴结初始细胞培养的概率。接下来，使用CO以CO为中心的激光显微镜将免疫细胞（T细胞）和神经细胞交叉对话的功能分析集中在钙信号上。当神经细胞通常通过蝎子毒物激活时，神经突起的钙离子浓度增加，并且在抹布时间几秒钟后，粘合到神经突出的T细胞的钙离子浓度显着增加。在未与神经突起的T细胞中未观察到T细胞钙浓度的这种升高。接下来，从神经突出中T细胞的钙信号传播中鉴定出该因子。当在β-肾上腺素受体中拮抗剂的存在下刺激神经细胞时，抑制了整体蛋白浓度依赖性的T细胞钙浓度。另外，在α-肾上腺素受体拮抗剂中未抑制T细胞钙浓度的升高。这些结果揭示了世界前面的世界，即诺adonellarin蛋白通过β-辅助蛋白受体参与T细胞的激活。