造血細胞のシグナル伝達

造血细胞信号传导

基本信息

批准号：
10181101
负责人：
宮島篤
金额：
$ 132.61万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 2001
项目状态：
已结题

项目摘要

造血細胞の増殖分化に関わるシグナルリングについての本年度の主要な成果は以下のようである。AGM領域で発生した造血幹細胞胎生肝臓での増幅をin vitroで再現し、長期の造血再構築能が発生段階が進むにつれて低下することを示した(宮島)。gp130欠損マウスマウスのAGM培養では、血球の出現がほぼ完全に抑制され、AGM内の背側大動脈に発現する分子としてendomucin-1を同定し、この分子が細胞接着阻害作用をもつことを見いだした(田賀)。c-Kitを介する細胞遊走シグナルやCa2+influxには、Y567/srcファミリーキナーゼ/p38MAPK経路とY719/PI3kinase経路の二経路が重要であることを明らかにした(金倉)。c-Kitに結合する新規分子Spredをクローニングし,細胞膜に局在し活性化されたRas, Rafと複合体を形成することで、チロシンキナーゼからのRas/MAKキナーゼ経路を選択的に阻害することを明らかにした(吉村)。Stat1とStat3の造血における機能を解析するために、抑制型Stat3トランスジェニックマウス、さらにStat1のKOマウスとの交配により、抑制型Stat3/Stat1 KOマウスを作製し、Stat3は巨核球系前駆細胞の増幅に、Stat1は赤芽球系前駆細胞の増幅に重要であることを示した(小松)。骨髄球特異的転写因子MZF-2に結合する核内因子を探索し,SWI2/SNF2型クロマチン再構成因子であるmDomino/p400を同定し,骨髄球分化に関わる遺伝子発現には,MZF-2とmDominoの相互作用によるクロマチン再構成が関与することを示唆した(福永)。新規Znフィンガータンパク質SalIのノックアウトマウスでは左右の腎臓が完全に欠失していた。胎生11.5日に尿管芽が間葉に進入して後腎の発生は開始するが、ノックアウトマウスではこの段階で発生が障害されており、この遺伝子は後腎発生のもっとも初期に必須であることが判明した。この遺伝子は腎臓未分化細胞である後腎間葉のみならず、神経幹細胞、ES細胞でも発現しており、共通の機構が幹細胞において働いている可能性が示唆された(横田)。

与造血细胞增殖和分化有关的信号的今年的主要结果如下。在体外重现了胚胎肝脏中AGM区域中发生的造血干细胞的扩增，表明长期造血重建能力随着发育阶段的进展而降低（Miyajima）。在GP130缺陷小鼠小鼠的AGM培养物中，几乎完全抑制了血细胞的出现，并且内核素-1被鉴定为AGM内背主动脉中表达的分子，并发现该分子具有细胞粘附抑制作用（TAGA）。我们已经透露，Y567/SRC家族激酶/p38mapk途径和Y719/PI3KINASE途径的两种途径对于C-KIT介导的细胞迁移信号和Ca2+Influx（Kanakura）很重要。我们已经克隆了一种新型分子，该分子呈现与C-KIT结合，并通过与活化的Ras形成复合物，并将RAF形成固定在细胞膜上的复合物，它选择性地抑制了从酪氨酸激酶（Yoshimura）的Ras/MAK激酶途径。为了分析STAT1和Stat3的造血功能，通过与抑制性STAT3转基因小鼠和Stat1 KO小鼠的交配来制备抑制性STAT3/Stat1 KO小鼠，这表明STAT3对于扩增巨核细胞祖细胞细胞和STAT1的扩增非常重要，而STAT1对于扩增晶状体的晶状体细胞非常重要。我们搜索了与骨髓细胞特异性转录因子MZF-2结合的核因子，并鉴定出MDOMINO/P400（一种SWI2/SNF2型染色质重排系数），表明通过MZF-2和MDORINO与MZF-2的相互作用涉及基因表达，染色质重排在骨髓型差异化中（Fukunaga）（Fukunaga）。左右肾脏用新颖的锌指蛋白sali完全删除了敲除小鼠。输尿管芽在胚胎生命的11.5中进入间质，并且肾上腺后肾的发育开始，但是在此阶段，在敲除小鼠的阶段发育受损，并且发现该基因在后期发育的最早是必不可少的。该基因不仅在肾脏间充质中表达，该肾脏间充源是一种未分化的肾细胞，而且在神经干细胞和ES细胞中也表达，这表明一种共同的机制可能在干细胞中起作用（Yokota）。