発達過程におけるグルタミン酸毒性プルキンエ細胞死の分子・細胞機構

发育过程中谷氨酸毒性和浦肯野细胞死亡的分子和细胞机制

基本信息

批准号：
10176201
负责人：
渡辺雅彦
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

海馬と小脳では、一過性脳虚血や過度な神経活動が引金となってグルタミン酸毒性による神経細ね死が起こりやすい。本研究では、神経細胞死に関与するグルタミン酸シグナル伝達分子機構を解明することを目的とした。この目的遂行のため、グルタミン酸受容体およびそのシグナル伝達分子に対する特異抗体作製し、電顕および共焦点レーザー顕微鏡を用いた局在解析を行った。昨年度は海馬の結果について報告しているが、本年度は小脳プルキンエ細胞について解析した。(1) NMDA型グルタミン酸受容体.小脳プルキンエ細胞には、GluR ζ 1サブユニットのみが発現し、GluR εの発現は検出できなかった。この事実は、ブルキンエ細胞では機能的なNMDA受容体は形成されないことを示唆しており、今後、non-NMDA受容体の活性化による細胞死メカニズムを追及する必要がある。(2) 代謝型グルタミン酸受容体:プルキンエ細胞には1型代謝型グルタミン酸受容体(mGluR1)が優勢に発現していることが知られている。この受容体にはGq型GTP結合蛋白が共役し、フォスフォリバーゼCβ(PLCβ)を活性化する。in situ hybridzationにより、プルキンエ細胞において、GαqとPLCβ3/4が優勢に発現していることが判明した。特異抗体を作製して免疫組織化学法により検討した結果、これらの分子はプルキンエ細胞シナブスの周囲部においてmGluR1と共存しており、機能的なシグナルカスケードを構成していることが示唆される。以上の結果は、プルキンエ細胞では海馬とは異なるグルタミン酸伝達機構を有しており、この分子機構を介して神経細胞死が誘発されるものと考えられる。

在海马和小脑中，瞬时脑缺血和过度的神经活动会触发，并且可能由于谷氨酸毒性而引起的神经欺骗。在这项研究中，目的是阐明涉及神经细胞死亡的谷氨酸信号分子机制。为了执行此目的，对谷氨酸接收器及其信号传输产生了特殊的抗体，并使用电子设备和CO以CO为中心的激光显微镜进行了局部分析。去年，我们报道了海马的结果，但今年我们分析了小脑PULKIN细胞。（1）NMDA型谷氨酸接收师。这一事实表明，功能性NMDA受体不会在Burkin-e细胞中形成，因此有必要通过激活非NMDA受体来追求细胞死亡机制。（2）代谢谷氨酸接待员：众所周知，1-型代谢谷氨酸受体（MGLUR1）以优势表达。 GQ -Type GTP组合蛋白是该受体中的一个CO--激活FosforiseCβ（PLCβ）。原位杂交表明，GαQ和PLCβ3/4在Purkin E细胞中占主导地位。由于制备了特殊的抗体并通过免疫化学定律检查，因此建议这些分子与Purkin -e -e细胞Synabs周围区域的MGLUR1共存，配置功能信号级联。以上结果表明，裁切细胞具有与海马不同的谷氨酸衍生物机制，并被认为通过这种分子机制诱导神经细胞死亡。