サル大脳皮質領野におけるNMDA型グルタミン酸受容体サブユニットの発現と局在

NMDA型谷氨酸受体亚基在猴大脑皮层的表达和定位

基本信息

批准号：
10164201
负责人：
渡辺雅彦
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

NMDA受容体はグルタミン酸受容体のサブタイプの一つで、その活性化はシナプス伝達効率の可塑的変化を誘発し、これが記憶や学習・脳の発達において重要な役割を果たしている。本研究では、終脳とくに大脳皮質領域の構造と機能が著しい分化を遂げた霊長類に注目し、この領域におけるNMDA受容体サブユニットの発現特性とシナプス局在を明らかにすることを目的とした。マウスサブユニットのN末およびC末ペプチド領域を大腸菌にて発現させ、得られたペプチドを抗原として、大脳皮質に発現するGluRε1・GluRε2・GluRζ1の3種のサブユニットに対する特異抗体を作製した。イムノブロットにより、これらの抗体はサルのサブユニットをも認識することが判明した。そこで、これらの抗体を用いてサル終脳パラフィン切片を酵素抗体法にて免疫染色を行った。その結果、3種のサブユニットはいずれも海馬、大脳皮質、線条体などの各終脳領域において高レベルで分布していた。第1次運動野と第1次感覚野では、それぞれのサブユニットは比較的均一な層分布が認められた。一方、その周囲の大脳皮質では層により免疫反応の強度が異なっており、しかも、サブユニット間で層分布特性が異なっていた。今後、この異なる層分布(垂直分布)が、個々のニューロンにおける異なる転写調節によるものなのか、それとも蛋白分子の異なるシナプス局在化調節によるものなのかを追求する目的で、in situhybridization解析を行う必要がある。

NMDA受体是谷氨酸受体的亚型之一，可引起突触效率的塑性变化，在记忆，学习和脑发育中起重要作用。在这项研究中，我们专注于具有脑皮质区域的结构和功能，尤其是脑皮质区域的作用，旨在阐明NMDA受体亚基在该区域的表达特征和sinaps的定位。在大肠杆菌中表达小鼠亚基N末端和C末期肽区域，并以抗原形式产生所获得的肽，并为三个亚单位创建了特殊的抗体：Glurε1，Glurε2和Glurζ1，这些抗体在该抗体中表达，这些抗体均表示。大脑皮层。 Imnobrot揭示了这些抗体识别猴子的亚单位。因此，使用这些抗体通过酶抗体法进行了猴子受体石蜡切割。结果，所有三种类型的亚单位均分布在每个末端区域的两端，例如海马，大脑皮层和布线。在第一个运动场和主要的感觉场中，每个子单元都是相对均匀的层分布。另一方面，在周围的大脑皮层中，免疫反应的强度根据层而不同，亚基之间的层分布特性不同。将来，在缩短杂交分析中，需要进行这种不同的层分布（垂直分布）是由于单个神经元的不同转录调整还是由于蛋白质分子的不同突触调节所致。