APC活性制御による染色体分配制御

通过控制 APC 活性来控制染色体分离

基本信息

批准号：
10162213
负责人：
戸所一雄
金额：
$ 1.66万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10162213/
关键词：
染色体 APC 細胞分裂

项目摘要

anaphase promoting complex/cycldosome(APC)は細胞分裂期特異的なユビキチンリガーゼとして働き、Cut2/Pdsl・をユビキチン化し姉妹染色体の分配を可能にし、cyclinBを分解しM期終了を可能にする。従ってAPCによる時期特異的、基質特異的な活性化が細胞分裂の進行にとって要となる。そこでヒトCdc20とCdhl/Hctlのホモログを単離し、姉妹染色体の分配開始にユビ・キチン化され分解される必要のあるCuL2/Pdslと、M期の終了に分解される必要のあるCyclin Bを基質とした基質特異的かつ時期特異的なN℃のユビキチ化活性の制御を調べた。その結果APCに結合しているCdc20がMPEによってリン酸化されるとN℃を活性化しCut2/PdslやCyclin Bをユビキチン化するが、PKAやMad2によって抑制されることが明らかになった。Cdc20は脱リン酸化されるとAPCの活性化は出来ない。またCdhlはMPFによりリン酸化されているとAPCに結合しないが、脱リン酸化されるとAPCに結合しAPCはCydin B等をユビ,キチン化する。これもPKAめリン酸化により抑制されるがMad2によつ.ては制御されない。このようにM期のAPCは時期特異的に特異的基質を自然な時間の流れの中で巧みに制御されながらユビキチン化していくことが判明した。M℃と活性化因子のリン酸化脱リン酸化、2種の活性化因子Cdc20とCdhl、チェックポイントによる阻害因子によって特異的基質をタイミング良くAPC活性は制御されることが明らかになった。MPFはPlk、Cdc20、Cdhlのリン酸化を通してAPCの活性を制御し、その結果自らの活性を必要な時だけ活性化するという見事なフィードバック制御を行っていることが明らかになった。

促进复合物/环阵体（APC）的后期充当有丝分裂相的泛素连接酶，泛素化cut2/pDSL ・，允许姊妹染色体的分布，降解cyclinb并允许m相终止。因此，APC的时序特异性和底物特异性激活对于细胞分裂进程至关重要。然后，我们使用CUL2/PDSL分离了人CDC20和CDHL/HCTL的同源物，并研究了在N°C下的基材特异性和周期特异性的泛素化活性，必须在姐妹染色体的分区开始时将其泛滥和降解，并在阶段degrald degrald degraded arded。结果，揭示了当Cdc20与APC结合时，MPE磷酸化时，它会激活n°C并cut2/pDSL和Cyclin B的泛素化，但被PKA和MAD2抑制。一旦CDC20被去磷酸化，就无法激活APC。此外，当通过MPF磷酸化时，CDHL与APC没有结合，但是当脱磷酸化时，它与APC结合，并且APC泛素化Cydin B等，并丁丁蛋白。 PKA磷酸化也抑制了这种情况，但不受MAD2的控制。因此，发现在时间流中以特定时间的方式巧妙地控制了M相apcs泛素化特定的特定底物。已经揭示了特定底物的APC活性通过M°C及时控制，并且激活剂的磷酸化，两个激活剂CDC20和CDHL以及检查点抑制剂。已经揭示了MPF通过PLK，CDC20和CDHL的磷酸化来调节APC的活性，从而施加出色的反馈控制，仅在必要时激活其自身的活性。