歯周組織破壊におけるサイトカインの役割りに関する実験病理学的研究

细胞因子在牙周组织破坏中作用的实验病理研究

基本信息

批准号：
08672073
负责人：
宮内睦美
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

LPSによって惹起される歯周組織破壊過程における腫瘍壊死因子(TNF)-αの役割を明らかにする目的で,7週齢ウィスター系雄性ラットの上顎臼歯咬合面上に5mg/ml濃度のLPS (E.Coli由来)溶液を浸した綿棒を1時間にわたって静置することにより,歯肉溝からのLPSの浸透投与を図り,投与開始後7日目までの第1・第2臼歯口蓋側辺縁歯周組織でのTNF-αmRNAの局在をオリゴヌクレオチドによるin situhybridization (ISH)法を用いて検討した。ISH法はPLP固定-EDTA脱灰クリオスタット切片を用い,キャピラリーアクション法を利用したFisher社のマイクロプローブ・システムにて行った.また,未処置材料でも同様に観察した.その結果,正常組織では,歯槽骨外縁の骨芽細胞細胞質に弱い反応がみられた.口腔歯肉上皮(OGE)や口腔歯肉溝上皮(OSE)の有棘層では,一部の細胞に非常に弱い反応が観察される程度で,接合上皮(JE)は陰性であった.投与1時間後,OGEの有棘層全層が弱く染まり始めた.3時間後,基底層を含むOGE・OSE全層が強い陽性反応を示した.JE細胞もTNF-αmRNAを発現するようになり,中にはJE全体が強く染色されるものもあった.歯肉や歯根膜上方部線維芽細胞の細胞質にも弱い陽性反応がみられ.歯槽頂部骨芽細胞の反応性は増強した.1日目,各上皮の反応は減弱する傾向を示したが,歯根膜線維芽細胞や骨芽細胞の反応性は逆に増強していた.また,JE直下結合組織の拡張した毛細血管周囲の浸潤細胞も陽性を呈した.セメント芽細胞,象牙芽細胞や破骨細胞にも陽性反応がみられた.投与2日目には,染色性の減弱が進み,中には正常とほぼ同様の所見を呈するものも観察された.以上,LPS投与後の歯周組織では各上皮細胞,歯肉・歯根膜線維芽細胞,骨芽細胞や浸潤細胞などがTNF-α産生に関わっていた.LPS刺激後,宿主細胞から一過性に産生されるTNF-αがLPSの辺縁歯周組織破壊に重要な役割を担うことをin vivoの実験系において明らかにができた.

为了明确肿瘤坏死因子(TNF)-α在LPS诱导的牙周组织破坏过程中的作用，我们将浓度为5 mg/ml的LPS涂抹在7周龄婴儿上磨牙咬合面上。雄性 Wistar 大鼠。（源自大肠杆菌）将棉签在溶液中浸泡1小时，尝试从牙龈沟渗入LPS，并在开始后7天内将其涂抹到第一和第二磨牙的腭缘使用基于寡核苷酸的原位杂交 (ISH) 研究牙周组织中 TNF-α mRNA 的定位。使用Fisher微探针系统，使用PLP固定且EDTA脱钙的低温切片进行毛细管作用法，此外，对未处理的材料进行类似观察，结果发现正常组织观察到弱反应。位于牙槽骨外缘的成骨细胞的细胞质中。在这种情况下，仅在一些细胞中观察到非常弱的反应，并且施用后一小时，连接上皮（JE）呈阴性，三小时后，OGE的整个棘层开始被弱染色。 OGE和OSE层，包括基底层，均呈强阳性反应。JE细胞也开始表达TNF-α mRNA，其中一些在整个JE中呈强染色。牙龈和牙周膜上线。成纤维细胞胞浆中也观察到弱阳性反应，牙槽嵴成骨细胞反应性增高。第一天，各上皮细胞反应呈下降趋势，但牙周膜成纤维细胞和骨的反应性相反，母细胞的反应性增强。此外，乙脑正下方的结缔组织中扩张的毛细血管周围的浸润细胞也显示出阳性反应。成牙骨质细胞、成牙本质细胞和破骨细胞也观察到阳性反应。第二天，染色逐渐减弱，有时与正常情况几乎相同。在LPS给药后的牙周组织中，观察到各种上皮细胞、成骨细胞等牙龈和牙周膜成纤维细胞和浸润细胞。 LPS刺激后，宿主细胞瞬时产生的TNF-α在LPS引起的牙周边缘组织破坏中发挥重要作用。这在体内实验系统中得到了澄清。