上皮性歯胚における細胞質シアリダーゼの不均一な局在とシアロ複合糖質との関連

上皮牙胚细胞质唾液酸酶的异质定位及其与唾液酸缀合物的关系

基本信息

批准号：
08672064
负责人：
秋田博敏
金额：
--
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

(研究目的)細胞質シアリダーゼの存在意義を追求するため、本酵素の遺伝子発現が、上皮性歯胚を構成する3種の細胞において、大きく異なる事実に注目し、次の2点を検討した。(1)エナメル髄の上皮細胞が、再び細胞質シアリダーゼを発現すること無くそのライフサイクルを終えるのか否か(免疫および遺伝子組織化学的手法を用いて)。(2)細胞質シアリダーゼの遺伝子発現量の変化に同調するシアロ複合糖質の量的または質的変化が、上皮性歯胚に認められるか否か(レクチン組織化学的手法を用いて)。(研究結果)ラット第一臼歯のエネメル質の形成前、形成期、成熟期、歯根形成期の上皮性歯胚について観察した。本酵素の発現は、遺伝子組織化学の結果では内外のエナメル上皮に比べエナメル髄において極めて低いが、電子顕微鏡を用いた免疫組織化学(免疫電顕)の結果では同じ程度であった。また、歯牙の形成過程に沿って経時的にみても、本酵素の発現は量的変化に乏しく各時期において同じ程度であった。一方、シアロ複合糖質の量は経時的に変化した。シアロ複合糖質の量は、形成期エナメル芽細胞と形成期初期の中間層細胞においても最も多かった。それ以外の時期、および部位においては相対的に少なかった。シアロ複合糖質の質的変化(シアル酸残基の結合部位が異なるタイプへの変化)は認められなかった。(考察、結論)本研究で観察したシアロ複合糖質は、主として細胞表面や細胞外基質に局在するものと考えられる。そのシアロ複合糖質の量的変化に本酵素の量的変化が明確に同期しないことから、本酵素が細胞表面や細胞外基質のシアロ複合糖質のライフサイクルに関与する可能性は低いと考えられる。今後は、細胞内のシアロ複合糖質の量的変化に注目し、それと本酵素との因果関係を検討する必要がある。

(Research Purpose) In order to pursue the existence of cytoplasmic sialidase, we focused on the fact that gene expression of this enzyme differed significantly in the three types of cells that make up the epithelial tooth germ, and examined the following two points: (1) Whether or not the epithelial cells of enamel pulp end their life cycle without expressing cytoplasmic sialidase again (using immunological and genetic histochemical技术）。（2）在上皮牙齿细菌（使用凝集素组织化学技术）中观察到与基因表达水平变化一致的唾液偶联碳水化合物的定量或定性变化。（研究结果）在大鼠第一磨牙的上皮牙齿在能量形成之前，在成熟时期和根形成期间的形成前观察到。与遗传组织化学中的内部和外搪瓷上皮相比，该酶在牙釉质脚底的表达非常低，但是使用电子显微镜在免疫组织化学（Immunoelectron显微镜）的结果中，该酶的表达相同。此外，即使观察到牙齿的形成过程，该酶的表达以定量方式变化不大，并且在每个时间段内处于相同水平。另一方面，随着时间的推移，唾液偶联的碳水化合物的数量发生了变化。唾液偶联的碳水化合物的量也是形式的搪瓷细胞和早期相间中间细胞中最高的。在其他时间和站点的情况相对较少。没有观察到唾液轭糖缀合物的质量变化（唾液酸残基结合位点与不同类型的变化）。（讨论，结论）本研究中观察到的唾液轭碳水化合物被认为主要定位于细胞表面和细胞外基质。由于该酶的定量变化与唾液酸缀合物碳水化合物的定量变化没有明确同步，因此人们认为该酶不太可能参与细胞表面和细胞外基质上的唾液酸偶联物碳水化合物的生命周期。将来，有必要专注于细胞内唾液酸偶联碳水化合物的定量变化，并检查该酶之间的因果关系。