横紋筋肉腫の発生、分化に関与する遺伝子異常の解析と組織診断への応用

横纹肌肉瘤发生、分化的基因异常分析及其在组织诊断中的应用

• 批准号: 08670223
• 负责人: 野島 孝之
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Kanazawa Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08670223/
• 关键词: 横紋筋肉腫; PAX3; PAX7; FKHR; 変異遺伝子; MyoD1; :myogenin

横紋筋肉腫は若年層に多く、予後不良な肉腫である。胞巣型では80%に2番と13番染色体の相互転座t(2;13)が認められる。t(2;13)の変形としてt(1;13)が胞巣型に報告されるが、胎児型や多形型では特異的な染色体異常は見い出されていない。この転座部では2番のPAX3と13番のFKHRが癒合し変異遺伝子を形成している。同様にt(1;13)ではPAX3の代わりにPAX7がFKHRと癒合する。胎児型では11番染色体短腕領域の欠失が見られるが、この欠失は胞巣型では見られず胎児型に特徴的である。我々は細胞株と新鮮手術材料を用い以下の検討を行った。1)変異遺伝子発現の検討RT-PCR法でPAX3-FKHDとPAX7-FKHD変異遺伝子の有無を検討し、また、CGH法で染色体全体にわたる染色体の欠失、過剰、遺伝子増幅の有無を解析した。その結果、10症例の胞巣型すべてにPAX3-FKHDあるいはPAX7-FKHDが存在していたが、胎児型では認めなかった。CGH法では両亜型共に染色体2、12、13番に高頻度の変化を認めた。2)筋分化制御遺伝子発現の検討10症例の横紋筋肉腫を用いて、筋分化制御遺伝子であるMyoD1とmyogeninの発現をRT-PCR法により比較した。その結果、10例中6例にMyoD1の発現を、また8例にmyogeninの発現を見たが、対照とした正常リンパ球、ラブドイド腫瘍、骨肉腫、滑膜肉腫では発現を見なかった。組織亜型ではMyoD1は胎児型3例中3例と胞巣型6例中1例が陰性で、myogeninは胎児型2例が陰性であった。多形型1例は両遺伝子とも発現を認めた。上記の結果より横紋筋肉腫の組織診断にPAX3-FKHD、PAX7-FKHD、MyoD1、myogeninの発現検索が有用であると思われた。また、組織亜型の相違に遺伝子発現の時期や発現量の関与が示唆された。

横纹肌肉瘤是一种常见于年轻人的肉瘤，预后较差。在 80% 的肺泡型中观察到 2 号染色体和 13 号染色体之间的相互易位 t(2;13)。 t(1;13) 是 t(2;13) 的变体，已报道有肺泡形式，但在胎儿或多态形式中尚未发现特定的染色体异常。在这个易位位点，第2位的PAX3和第13位的FKHR融合形成突变基因。类似地，在 t(1;13)，PAX7 与 FKHR 而不是 PAX3 融合。 11号染色体短臂区的缺失在胎儿型中可见，但这种缺失在肺泡型中未见，是胎儿型的特征。我们使用细胞系和新鲜手术材料进行了以下研究。 1)突变基因表达的检查使用RT-PCR研究PAX3-FKHD和PAX7-FKHD突变基因的存在或不存在，并使用CGH方法分析整个染色体上染色体缺失、过量和基因扩增的存在或不存在。结果，PAX3-FKHD 或 PAX7-FKHD 存在于所有 10 种肺泡类型中，但不存在于胎儿类型中。 CGH 方法揭示了两种亚型的 2、12 和 13 号染色体频繁变化。 2)肌肉分化调节基因表达的检查使用10例横纹肌肉瘤，通过RT-PCR比较肌肉分化调节基因MyoD1和肌细胞生成素的表达。结果，10例中有6例观察到MyoD1表达，8例观察到肌细胞生成素表达，但在作为对照的正常淋巴细胞、横纹肌样瘤、骨肉瘤和滑膜肉瘤中未观察到表达。关于组织学亚型，3个胎儿型病例中有3个MyoD1呈阴性，6个肺泡型病例中有1个呈阴性，2个胎儿型病例中肌细胞生成素呈阴性。在一种多态性情况下，观察到两种基因的表达。基于上述结果，寻找PAX3-FKHD、PAX7-FKHD、MyoD1和myogenin的表达对于横纹肌肉瘤的组织学诊断是有用的。此外，基因表达的时间和表达水平被认为与组织亚型之间的差异有关。

项目成果

野島孝之: "軟部腫瘍と染色体異常" 検査と技術. 24. 476-478 (1996)

Takayuki Nojima：“软组织肿瘤和染色体异常”测试与技术 24. 476-478 (1996)。

S.Weber-Hall,et al.: "Novel formation and amplification of the PAX7-FKHR fusion gene in a case of alveolar rhabdomyosarcoma" Genes Chromosom. Cancer. 17. 7-13 (1996)

S.Weber-Hall 等人：“肺泡横纹肌肉瘤病例中 PAX7-FKHR 融合基因的新形成和扩增”基因染色体。

S.Weber-Hall,et al.: "Gains,losses,and amplification of genomic material in rhabdomyosarcon analyzed by comparative genomic hybridization" Cancer Research. 56. 3220-3224 (1996)

S.Weber-Hall 等人：“通过比较基因组杂交分析横纹肌肉组织中基因组物质的增益、损失和扩增”癌症研究。