肝癌の病態生理と治療に関する研究-肝癌及び担癌肝における肝細胞増殖因子の関与

肝癌的病理生理及治疗研究——肝细胞生长因子在肝癌及荷瘤肝脏中的作用

基本信息

批准号：
06671236
负责人：
野島孝之
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kanazawa Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06671236/
关键词：
肝臓肝癌肝再生 c-met Met蛋白チロシンリン酸化

项目摘要

肝細胞は強い再生能を有している。近年、肝細胞増殖因子(HGF)が同定され、その受容体としてc-metが明らかにされた。肝癌の病態を理解し、治療に応用する基礎的研究のため、肝再生や肝細胞の癌化におけるc-met遺伝子の役割について以下の検討を加えた。1)ラット肝再生におけるc-metの遺伝子発現の検討Wistar系ラットの肝を2/3切除後、経時的に肝組織を採取し、RIPAバッファー中でホモジネイト後上清を調整した。蛋白濃度の定量、ウエスタンブロット法やレクチン沈降法にるMet蛋白の発現を解析した。その結果,肝切除12時間後より残存肝細胞膜表面にMet蛋白proreceptor(p190^<proMET>)およびリン酸化チロシンの減少が見られ、この状態は7日目まで続いた。このことは肝の再生に関連して多量に生産されたHGFをMet蛋白が持続的に肝細胞内に取り込むためと考えられた。2)肝癌におけるc-met遺伝子発現様式の検討ヒト肝癌18症例を用いて、腫瘍部と同一症例における非腫瘍部とのc-met遺伝子発現量およびリン酸化チロシン蛋白量を比較検討した。その結果、腫瘍部ではMet蛋白β鎖(p145β^<MET>)の発現が、一方、非腫瘍部ではMet蛋白proreceptor(p160^<proMET>)の発現が高かった。肝癌の組織学的な比較では、高分化型肝細胞癌は低分化型に比べてMet蛋白の発現が高かった。上記の結果よりMet蛋白proreceptorのプロセッシングが肝臓の再生と腫瘍化に密接に関連しているものと思われた。

肝细胞具有强大的再生潜力。近年来，已经鉴定出肝细胞生长因子（HGF），并且C-MET已被揭示为其受体。为了了解肝癌的病理并将其应用于治疗，已经对C-MET基因在肝细胞的肝脏再生和癌症中的作用进行了以下研究。 1）在2/3切除Wistar大鼠的肝脏后，检查大鼠肝脏再生中C-MET基因表达，随着时间的推移收集肝组织，并在RIPA缓冲液中制备了均质化后的上清液。分析了通过蛋白质印迹和凝集素沉淀的蛋白质浓度和MET蛋白质表达的定量。结果，在肝切除术后12小时，在剩余的肝细胞膜的表面上观察到MET蛋白前受感受器（p190^<promet>）和磷酸化的酪氨酸的降低，并且这种情况一直持续到第7天。这被认为是可持续的蛋白质，因为Met蛋白可持续地吸收了HGF，这是在大量的fiver inver inver in connection in connection in connection in connection connection in connection connection。 2）检查肝癌中C-MET基因表达模式。使用18例人肝癌，将C-MET基因表达和磷酸化的酪氨酸蛋白与相同的肿瘤区域进行了比较，并将相同量的C-MET基因表达和磷酸化的酪氨酸蛋白与相同肿瘤区域进行了比较。结果，肿瘤区域中MET蛋白β链（P145β^<Met>）的表达很高，而非肿瘤区域中MET蛋白蛋白前受体受体（P160^<promet>）的表达很高。在肝癌的组织学比较中，分化良好的肝细胞癌显示出，MET蛋白的表达高于较差的形式。基于上述结果，看来MET蛋白前受体的加工与肝脏再生和肿瘤化密切相关。