トリプレットリピート伸展疾患の遺伝子診断法の確立、病態解析、新たな疾患遺伝子同定

三联体重复扩增疾病遗传诊断方法的建立、病理分析及新疾病基因的鉴定

• 批准号: 08457230
• 负责人: 桃井 真里子
• 金额: $ 4.8万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 1997
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08457230/
• 关键词: トリプレットリピート; 脆弱X症候群; 精神遅滞; トリプレットリピート伸展疾患; 家族性精神遅滞

A.トリプレットリピート配列伸展疾患のうち、(CGG/GGC)n疾患について、遺伝子診断スクリーニング法に関する検討をおこなった。(1)脆弱X症候群A,Eについてのスクリーニングを行い、PCR-サザン法にて、検出率100%の方法を確立した。PCRは男児について、正常-異常の判定を行い、Puf1ポリメラーゼ使用にて、100%の検出率を得た。これにより、正常バンドが検出できない例は、患者であることが判明し、スクリーニング法として優れていた。精神遅滞施設における患者スクリーニングでは、1例の脆弱X症候群Aが診断された。(2)尿における脆弱X症候群A,Eの遺伝子スクリーニング:血液と同様にPuflポリメラーゼを使用したPCRスクリーニングをおこなった。正常フラグメントの検出率は小児において低く(80%)、沈渣細胞の量、塩濃度などが影響すると思われた。B.小脳変性症、片頭痛を合併する大家系において、(CAG)n伸展を解析した。リピート伸展は検出されず、塩基置換、または、小欠失である可能性があり、全塩基配列を解析している。塩基配列異常が検出されることで、遺伝子発現異常の分子病態を明らかに出来ると考えられる。

答：在三胞胎重复阵列扩展疾病中，（CGG/GGC）N-疾病有关遗传诊断筛查方法。 （1）对脆弱的X综合征A和E进行了筛查，并通过PCR-南方法建立了100％检测率的方法。 PCR对男孩做出了正常的临时判断，并使用PUF1聚合酶获得了100％的检测率。结果，发现无法检测到正常带的情况是患者，并且作为筛查方法非常出色。在心理延迟设施中的患者筛查中，诊断出一种脆弱的X综合征A。 （2）使用PUFL聚合酶与血液中的PUFL聚合酶一起筛选尿液中的易受攻击X-类染料。正常碎片的检测率较低（80％），预计沉积物细胞，盐浓度等的量。 B.（CAG）在合并小脑变性和偏头痛的房东系统中分析了N扩展。未检测到重复扩展，它可能是基本替代品或小缺失，并且分析了整个碱基序列。据认为，可以通过检测基础序列异常来获得基因表达异常的分子病理状况。

项目成果

Mukasa T,Khoroku Y,Tsukahara T,Momoi MY,et al.: "Wortmannin enhances cpp32-like actirity during neuronal differentiation of P19EC cells." Biochem.Biophys.Res.Commun.(in press). (1997)

Mukasa T、Khoroku Y、Tsukahara T、Momoi MY 等人：“Wortmannin 增强 P19EC 细胞神经元分化过程中的 cpp32 样活性。”

Fujita et al.(Momoi): "Involvement of sonic hedgehogin the cell growth of LK-2 cells,human lung squamous carcinoma cells." Biochem.Biophys. Res.Commun.238. 658-664 (1997)

Fujita 等人（Momoi）：“声波刺猬蛋白参与 LK-2 细胞、人肺鳞癌细胞的生长。”

Mukasa et al.(Momoi): "Wortmannin enhances CPP-32 activity during neuronal differentiation of P19EC cells induced by retinoic acid." Biochem.Biophys.Res.Commun.232. 192-197 (1997)

Mukasa 等人（Momoi）：“在视黄酸诱导的 P19EC 细胞神经元分化过程中，渥曼青霉素可增强 CPP-32 活性。”

Urase K,Murasa T.Igarashi H,Ihii Y,Yasugi S,Momoi M.: "Spatial Expression of Sonic Hedgehog in the Lung Epathelium during Branching Morphogenesis" Biochem.Biophys.Res.Commun.225. 161-166 (1996)

Urase K，Murasa T.Igarashi H，Ihii Y，Yasugi S，Momoi M.：“分支形态发生过程中肺上皮细胞中 Sonic Hedgehog 的空间表达”Biochem.Biophys.Res.Commun.225。

Yamagata et al.(Momoi): "Genome organization of human 48 kDa oligosaccharyltransferase." Genomics. 45. 535-540 (1997)

Yamagata 等人（Momoi）：“人类 48 kDa 寡糖转移酶的基因组组织。”