Anti-tick vaccines targeting tick symbionts

针对蜱共生体的抗蜱疫苗

• 批准号: 22KF0005
• 负责人: 中尾 亮
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KF0005/
• 关键词: コクシエラ様共生菌; マイクロビオーム; ビタミンB; マダニ; RNAseq; ワクチン

本邦において優占するチマダニ属マダニにおいて、多くの種が保有することが知られているコクシエラ様共生菌について、引き続き解析を進めた。まず、昨年度のRNAseq解析により見出された複数のワクチン候補遺伝子（SufB遺伝子：鉄・硫黄クラスターの形成等にかかわる遺伝子等）について解析を進めた。フタトゲチマダニ実験室維持株を用いてウサギを用いた吸血試験に供し、吸血前および吸血後のマダニを回収した。マダニを解剖し、各臓器からトータルRNAを抽出し、ターゲット遺伝子を特異的に増幅するRT-PCR系によりその発現動態を測定した。しかしながら、RNAseq解析の結果とは異なり、ターゲットとした遺伝子の有意な発現は確認できなかった。この結果は、マダニの各臓器から取得したRNAseqデータを統合してin silico解析に用いたことにより、中腸等に存在する他の細菌群の発現遺伝子の影響を受け、低発現のコクシエラ様共生菌由来遺伝子が高発現遺伝子として誤って検出された可能性が示唆された。そこで、フタトゲチマダニの臓器別に取得したRNAseqデータを用いて再解析を行い、ワクチン候補遺伝子の再検討を行った。すなわち、コクシエラ様共生菌が主に局在することが報告されているマルピーギ管および卵巣由来の発現データを用い、アセンブリ、機能予測を行った。次に、吸血後に発現上昇が見られる遺伝子、吸血状態に関わらず高発現する遺伝子、ビタミン代謝に関わる高発現遺伝子の３つの指標に絞り、各項目で10遺伝子を上限にワクチン候補遺伝子として抽出した。ビオチン(ビタミンB7)の生合成に関わる遺伝子等が候補として検出された。

我们继续对类柯克斯体共生细菌进行分析，已知这种共生细菌由许多种类的硬蜱携带，这些蜱在日本占主导地位。首先，我们对去年通过RNAseq分析发现的多个疫苗候选基因（SufB基因：参与铁硫簇形成的基因等）进行了分析。将实验室保存的硬蜱菌株用于兔子的血液喂养试验，并在喂养前后收集蜱虫。解剖蜱虫，从每个器官中提取总 RNA，并使用特异性扩增靶基因的 RT-PCR 系统测量表达动态。然而，与RNAseq分析的结果不同，无法确认目标基因的显着表达。通过整合从蜱的每个器官获得的RNAseq数据并将其用于计算机分析，该结果表明，由于中肠中存在的其他细菌群的表达基因的影响，类柯克斯体共生体的表达不足。有人提出，真菌来源的基因可能被错误地检测为高表达基因。因此，我们利用从硬蜱的每个器官获得的RNAseq数据进行了重新分析，并重新检查了疫苗候选基因。也就是说，使用来自马氏小管和卵巢的表达数据进行组装和功能预测，据报道，类柯克斯体共生细菌主要位于其中。接下来，我们重点关注三个指标：喂血后表达增加的基因、无论喂血状态如何高表达的基因以及与维生素代谢相关的高表达基因，并为每一项提取最多10个基因作为疫苗候选基因。 。检测到参与生物素（维生素 B7）生物合成的基因作为候选基因。

项目成果

アシュート大学(エジプト)

阿斯尤特大学（埃及）

Tick-borne diseases in Egypt: A one health perspective

埃及的蜱传疾病：单一健康视角

• DOI: 10.1016/j.onehlt.2022.100443
• 发表时间: 2022
• 影响因子: 5
• 作者: Abdelbaset Abdelbaset Eweda;Nonaka Nariaki;Nakao Ryo
• 通讯作者: Nakao Ryo