アルコール性肝障害でのepimorphinとα-smA陽性細胞の免疫組織学的検討

酒精性肝损伤中 Epimorphin 和 α-SmA 阳性细胞的免疫组织学检查

• 批准号: 07770400
• 负责人: 浦島 左千夫
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kanazawa Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770400/
• 关键词: アルコール性肝障害; 伊東細胞; α-平滑筋アクチン; epimorphin

アルコール(AL)性肝障害での特有の線維化には、細胞外基質を産生する伊東細胞が重要な役割を演じていると考えられており、活性化伊東細胞ではα-平滑筋アクチン(α-smA)が認められるようになることも明らかにされている。そこで、AL性および非AL性肝障害患者の生検肝組織について、α-smAの免疫組織学的染色を行い、両群での活性化伊東細胞の数および質的変化について比較検討した。対象および方法:AL性肝線維症(AL-F)21例と肝硬変(AL-LC)9例および非AL性の慢性肝炎(CH)19例とLC4例を対象とし、入院時(禁酒直後)に生検により得られた肝組織を用いた。また、AL-Fの7例とAL-LCの9例については、禁酒後4-10週後に再度肝生検を施行し、同様に検討した。免疫組織学的染色はパラフィン包埋肝組織切片について、モノクローナル抗体を反応させた後、Streptavidin-Biotin法による酵素抗体法を施行した。成績:α-smAはAL-F症例の中心静脈周囲と小葉内の類洞壁に伸びた線維に一致して染色され、線維化の進展に伴って染色性は強くなった。一方、非AL性CHでは、門脈域周囲とそこから伸びる線維に沿って、特に進展する線維の先端部に陽性所見が認められたが、その染色性は、AL性と比べると明らかに弱かった。AL-LCでは線維性隔壁の他に、小葉内にも強く認められたが、非AL性のLCでは小葉内での染色性はほとんど認められなかった。α-smA陽性細胞数についてみると、AL-Fでは線維化の早期より、非AL性CHよりも有意に多く認められた。LCでもAL性での小葉内の陽性数は非AL性と比べ明らかに増加していた。さらに、AL性肝障害で禁酒直後と禁酒4-10週後とを比べると、AL-FとLCのいずれにおいても、α-smA陽性細胞数は明らかに減少していた。なお、抗epimorphin抗体による検討も企図したのであるが、現在多くのhybridomaから、最も抗体活性が高く、免疫組織化学の検討に適したモノクローナル抗体を作製中である。結語:以上のごとく、AL性肝障害では伊東細胞の活性化が惹起されており、特有な線維形成に関与していると考えられた。また、活性化の機序は禁酒により比較的短期間で消失することが示唆された。

据认为，产生细胞外基质的ITO细胞在酒精（Al）肝损伤的独特纤维化中起重要作用，并且还发现在激活的ITO细胞中发现α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）在α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）中观察到。因此，对α-SMA的AL和非AL肝损伤患者的活检肝组织对α-SMA进行了免疫组织学染色，并比较了两组激活的ITO细胞的数量和定性变化。受试者和方法：21例Al肝纤维化（AL-F），9例肝硬化病例（AL-LC），19例非Al慢性肝炎（CH）和4例LC病例，并在住院治疗时使用了活检（在保证后）通过活检获得的肝组织。此外，禁止后4-10周再次对7例AL-F和9例AL-LC病例进行肝活检，并进行了类似的检查。为了进行免疫组织学染色，将石蜡包裹的肝组织切片与单克隆抗体反应，然后使用链霉亲蛋白 - 生物素法对酶抗体法进行了酶抗体法。结果：α-SMA持续染色，纤维延伸至围绕中央静脉周围的正弦壁和Al-F病例的小叶中，并且随着纤维化的进展，染色变得更强。另一方面，在非AL CH中，在晚期纤维的尖端，尤其是沿门静脉区域以及从那里延伸的纤维沿着纤维的尖端观察到阳性发现，但它们的染色显然比Al CH中的纤维较弱。除LC中的纤维隔膜外，在小叶中也有很强的观察到，但在非AL LC中，小叶中几乎没有染色。从α-SMA阳性细胞的数量中，Al-F明显大于纤维化的早期阶段，而不是非AL CH。在LC中，与非AL相比，在LC中，叶中叶叶中的阳性测试数量明显增加。此外，当比较4-10周的抗肝损伤与Al肝损伤时，Al-F和LC中的α-SMA阳性细胞的数量明显减少。此外，尽管已经计划了使用抗epy蛋白抗体的研究，但许多杂交瘤目前正在产生具有最高抗体活性并且适用于免疫组织化学研究的单克隆抗体。结论：如上所述，Al肝损伤诱导ITO细胞的激活，并被认为与独特的纤维化形成有关。还提出，由于禁欲，激活机理在相对较短的时间内消失。