未成熟染色体凝集法を用いたヒト悪性腫瘍の放射線感受性予測法の研究

未成熟染色体聚集法对人类恶性肿瘤放射敏感性预测方法的研究

基本信息

批准号：
05770682
负责人：
笹井啓資
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770682/
关键词：
未成熟染色体凝集蛍光in situ hybridization 放射線感受性予測法

项目摘要

おもにin vitroで本法の有用性を検討した。使用した細胞は、正常ヒト線維芽球細胞AG1522およびN3、Ataxia Telangiectasia 患者由来ヒト線維芽細胞AT5BIおよびAT2052、ヒト悪性黒色腫細胞Melanoma903、ヒト線維肉腫細胞HT1080の放射線感受性の異なる6種の細胞である。これらの細胞とM期Hela細胞を細胞融合させ未成熟染色体凝集を誘導した。ヒト第4染色体に特異的なDNAプローブを用い蛍光in situ hybridizationを行い、ヒト第4染色体のみがfluoresceinによる黄色の蛍光を発し、他の染色体はpropidium iodideにより赤色の蛍光を発するよう二重染色し、容易に第4染色体異常が観察可能となった。まず、放射線照射後24時間後の細胞を用いて、それぞれの細胞の放射線感受性をコロニー法にて求めた。次に、それぞれの細胞系の放射線照射直後の第4染色体切片数と放射線線量との関係を求めた。放射線照射直後の第4染色体異常の頻度は、照射線量に比例し、同一の照射線量では放射線感受性の異なる細胞でも等しかった。一方、放射線照射24時間後の第4染色体切片数と放射線線量との関係を求めると、それぞれの細胞系で、染色体切片数は放射線照射直後に比較して減少し、さらに染色体切片数は放射線線量の増加にともない増加した。同一の放射線線量では、放射線感受性の高い細胞ほど第4染色体切片数が多かった。また、細胞の放射線感受性と無関係に、放射線照射24時間後の第4染色体切片数から細胞生存率が推定できた。手術組織を用いた研究は、現在進行中で、症例数が少なく結論はでていない。今後、症例を増やし本法の臨床応用への可能性を検討し、放射線感受性予測法としての確立をめざす。

我们主要检查了该方法在体外的有用性。使用的细胞是正常人成纤维细胞AG1522和N3的6种不同的放射敏性，人类成纤维细胞AT5BI和AT2052，人类恶性黑色素瘤细胞黑色素瘤903和人类纤维肉瘤细胞HT1080。这些细胞和M期HeLa细胞被融合以诱导未成熟的染色体聚集。使用针对人类4号染色体的DNA探针进行荧光，只有人类4染色体发出的黄色荧光素，而其他染色体则用丙二酰丙啶进行双染色以发射红色荧光，从而使4染色体4染色体可见。首先，使用辐射照射后24小时通过菌落法确定每个细胞的辐射敏感性。接下来，确定了辐射照射后立即在辐射辐射后立即确定染色体4部分的数量与每个细胞系的辐射剂量之间的关系。辐射照射后立即染色体4异常的频率与剂量成正比，并且在同一剂量下具有不同辐射敏感性的细胞相等。另一方面，当我们研究辐射照射后24小时24小时的染色体截面数量与辐射剂量之间的关系时，在每种细胞系中，染色体切片的数量与辐射照射后立即减少，染色体切片的数量随辐射剂量增加而增加。在相同的辐射剂量下，对辐射敏感的细胞具有越多的染色体部分。此外，无论细胞的辐射敏感性如何，可以从辐射照射后24小时后4小时从染色体第4个部分的数量估算细胞存活率。目前使用手术组织的研究正在进行中，几例，没有结论。将来，我们将增加病例的数量，并检查该方法临床应用的可能性，并旨在将其确定为预测辐射敏感性的方法。