細胞分化誘導剤の臨床応用に関する基礎的研究

细胞分化诱导剂临床应用基础研究

基本信息

批准号：
02151060
负责人：
斎藤政樹
金额：
$ 10.5万
依托单位：
Jichi Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02151060/
关键词：
ピリミジンヌクレオシド化合物蛋白リン酸化酵素阻害剤 PI代謝回転阻害剤ミオシンL鎖キナ-ゼ阻害剤 MDS由来細胞株 AraC感受性アポプト-シスラット骨髄前脂肪細胞株RECAー16 分化誘導剤脂質性合成シアロ糖化合物特異的チロシンキナ-ゼ阻害物質抗癌剤排出性P糖蛋白活性型ビタミンD3 トランスフォ-ミング増殖因子(TGF)β 造血因子MーCSF インスリン受容体βサブユニット自己リン酸化反応

项目摘要

(1)新規合成した18種のピリミジンヌクレオシド化合物の中で3ーヘンジルー5ーメチルー3ー(βーDーリボフラノシル)ピリド[2,3ーd]ピリミジンー2,4(1H,3H)ージオン(TIー79)がヒト白血病HLー60細胞に対して最も強い分化誘導活性を示した。この活性は高濃度アデノシンで抑制され、レチノイン酸(RA)、ビタミンD3、スタウロスポリン等の分化誘導剤併用で著しく促進された。各種蛋白リン酸化酵素阻害剤(ゲニステイン、メチル2,5ジヒドロシンナメイト)及びPI代謝回転阻害剤(プシ・テクトリゲニン)、ミオシンL鎖キナ-ゼ阻害剤(MLー9,MLー7)はいずれもHLー60細胞を顆粒球様細胞に分化させた。従って、蛋白リン酸化酵素やPI代謝回転抑制が白血病細胞分化誘導機序に関与していることが判明した。熱帯産コウチモクタマツナギから単離された分子量314のチロシンキナ-ゼ阻害物質は、A431細胞のEGFで誘導される細胞内チロシン・リン酸化及び形態変化を阻害した。(2)ヒト白血病細胞(K562,HEL,KU812)はヘミン処理で赤芽球様細胞に分化するとAraCに対する感受性が著増した。K562細胞ではゲニステインで赤芽球様細胞に分化する際にもAraC感受性が増大した。AraC感受性増強機構は、1)AraCの細胞内取込み増加、2)細胞内AraCデアミナ-ゼ活性低下、3)AraCキナ-ゼ活性増加によるAraーCTP形成の著増(約8倍)でDNA合成が強く阻害されるためである。(3)MDS由来P39細胞では、RA等の分化誘導剤添加時に、分化と共にアポプト-シスが高率に誘導される。更に、白血病細胞株HLー60、U937、KG1、K562との感受性比較で、アクチノマイシンDやA23187によるP39細胞のアポプト-シス高感受性が示唆された。単球系分化誘導剤オキサ型ビタミンD3の前処理でアポプト-シスが3ー5倍増強する。(4)ラット骨髄前脂肪細胞株RECAー16上でラット白血病細胞WRTー7を重層培養すると90%以上がマクロファ-ジに分化し、これはRECAー16細胞が産生するMーCSF及びILー6によることが抗体添加実験で判明した。更に同系ラットにWRTー7細胞を腹腔内接種、RhMーCSFとRhーILー6を投与したところ、各々単独では有意の延命効果は得られなかったが、両者を併用投与することにより著明な相乗的延命作用が見られた。

（1）在18种新合成的嘧啶核苷化合物中，3-Hengeru5-甲基Ru3-（β-D-核硫代氨基糖基）吡啶并[2,3-D]嘧啶-2,4（1H，3H）-Dione（TI-79）表现出对最大的分化 - 抗性活性的人类LEUKEMIA HL。高浓度的腺苷抑制了这种活性，并通过分化诱导剂（例如视黄酸（RA），维生素D3和staurosporine）的结合显着增强了这种活性。各种蛋白质磷酸酶抑制剂（染料木黄酮，2,5二氢苯甲酸甲酯），PI抑制剂（PSI techtrigenin）和肌球蛋白L链Quinase抑制剂（ML-9，ML-7）将HL-60细胞分化为粒细胞细胞的HL-60细胞。因此，发现蛋白质磷酸酶和PI更新抑制与诱导白血病细胞分化的机制有关。从热带猴子分离的314个分子量的酪氨酸激酶抑制剂，抑制了EGF诱导的A431细胞中EGF诱导的细胞内酪氨酸磷酸化和形态变化。（2）人类白血病细胞（K562，HEL，KU812）在HEMIN治疗后分化为红细胞细胞，显着提高了它们对ARAC的敏感性。在K562细胞中，当染料木黄酮分化为红细胞细胞时，ARAC敏感性也会提高。增强ARAC敏感性的机制是1）增加了ARAC的细胞内摄取，2）降低细胞内ARAC脱氨酶活性，3）增加ARAC激酶活性通过显着增加ARAC CTP的形成可大大抑制DNA合成（约8倍）。（3）在MDS衍生的P39细胞中，当添加分化诱导剂（例如RA）时，凋亡以高速率诱导，并分化。此外，当比较对白血病细胞系HL-60，U937，KG1和K562的敏感性时，建议p39细胞极易受到肌动菌菌素D和A23187的凋亡的敏感性。单核细胞分化诱导剂OXA型维生素D3的预处理增加了3-5倍。（4）当将大鼠白血病细胞WRT-7培养在大鼠骨髓前脂肪细胞系RECA-16上时，超过90％的细胞分化为巨噬细胞，并且在抗体添加实验中揭示了这是由于M-CSF和RECA-6引起的RECA-16细胞引起的。此外，当将WRT-7细胞与RHM-CSF和RH-IL-6接种腹膜内，将大鼠用于腹膜内，RHM-CSF和RH-IL-6时，当组合施用时，结果显示出显着的协同生命生命效应。