蛋白キナーゼによる癌の水解酵素のリン酸化とその意義

蛋白激酶对癌水解酶的磷酸化及其意义

基本信息

批准号：
62015003
负责人：
賀佐伸省
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1987
资助国家：
日本
起止时间：
1987 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-62015003/
关键词：
リソゾーム水解酵素蛋白キナーゼリン酸化

项目摘要

癌におけるリソゾーム酵素蛋白のリン酸化の亢進は,蛋白キナーゼ(PK)を介した酵素の代謝調節の異常による可能性が極めて高い. これを明らかにするため, 1,酵素蛋白をリン酸化するPKの同定とリン酸化siteの解析2,PK活性を調節する因子の解析,3,癌細胞におけるリソゾーム酵素の代謝回転速度の変化について調べた.1,精製アリルスルファターゼB(ASB)およびβーグルクロニダーゼ(BGV)はcAMP依存性PK(APK)によりリン酸化され, ASBはリン酸化ペプチドXを与える. 一方in vivoではXの他にYが検出され, このYは本来正常組織中の酵素中に存在する(0.6モル1分子)と見られることからXが癌関連リン酸化siteであり,癌で亢進するAPKによってリン酸化されている. この現象は白血病細胞でも確かめられた. 次に,cGMP依存性,Ca依存性,カゼインキナーゼ,チロシンキナーゼによるリン酸化反応を試みたが, Yをリン酸化するPKを同定する事は出来なかった. 更に追究を要する. また,肺癌組織のAPKのRegulatory subunitを解析した結果,癌ではRIIが主成分であることからASBはAPKII型でリン酸化されることが明らかになった.2,上記リン酸化反応に対してG蛋白質の関与の可能性を培養細胞で調べた結果,各々Gs,Giのリボシル化に関与するコレラ毒素,百日咳毒素は有効ではなかったが,Catalytic subunitに働くホルスコリンは癌,正常細胞共にASBのリン酸化を有意に亢進させた.3,培養ヒト癌細胞と非癌細胞について,リソゾーム酵素(ASB,ASA,βGU,カテプシンD)の代謝回転速度を調べたところ, 癌で速い成熟化が起り,かつ寿命は長い酵素が多かった. これはELISA法によって得た肝癌組織のカテプシンD酵素蛋白の増量の事実を裏づけるものである. リソゾーム酵素の代謝課程における蛋白のリン酸化の意義について, 更に追究する必要があろう.

由于蛋白激酶（PK）的代谢调节异常，溶菌酶蛋白在癌症中的磷酸化非常可能。 3，研究癌细胞中溶酶体酶的代谢旋转速度的变化是通过cAMP依赖性PK（APK）磷酸化的，另一方面，ASB会磷酸盐。，该y最初是在正常组织中的酶（），因为它被视为0.6摩尔1分子），X是与癌症相关的磷酸化，并被APK磷酸化，这也是由癌症增强的。在白血病细胞中，我们试图通过Cason激酶和酪氨酸激酶的磷酸化反应，但无法鉴定PKS氧化。已经揭示了ASB被APKII类型磷酸化，因为RII是主要成分.2，这是由于研究了与培养细胞的磷酸化反应中G-蛋白的可能性。逆转，但可用于催化亚基的Holscoline对细胞和非癌细胞无效。由于癌症和长期生命的酶，它的快速成熟。。