腎細胞癌患者血清に於ける硫酸化酵素の発現と臨床応用に関する研究

肾细胞癌患者血清中硫酸化酶的表达及其临床应用研究

基本信息

批准号：
01015004
负责人：
賀佐伸省
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01015004/
关键词：
腎細胞癌血清診断硫酸化酵素肝細胞癌硫酸化糖脂質

项目摘要

腎細胞癌、胃癌、肺腺癌などの腺癌組織では複数の硫酸化糖脂質が著増していた。その直接的原因は糖脂質を硫酸化する硫酸転移酵素の活性亢進によるものであった。この現象は腎細胞癌で最も顕著であった。この様な組織レベルでの生化学的特性が血清に反映して、特に有効な腫瘍マーカーを持たない腎細胞癌の血清診断に有効か否かを検討した。また、他の癌血清についても調べ、更に本酵素の生化学的性状を解析した。糖脂質硫酸化酵素の活性測定法は従来、煩雑な方法が用いられていたが、より簡便で迅速な改良法を開発した(Anal.Biochem.,1989)。しかし、本酵素の生成物である硫酸化糖脂質は血清蛋白に結合することから、改良法を更に改善して血清酵素の活性を測定した。その結果、健常人血清に比べて、腎細胞癌で有意に活性が亢進しており、他の固形癌血清、胃癌、肺癌、大腸癌、膀胱癌、子宮癌、こうがん癌では正常レベルであった(Eur.J.Biochem,.1990,印刷中)。しかし、腎細胞癌より肝細胞癌が最も高値を示した。肝癌以外の肝疾患血清では、肝硬変や肝炎は正常レベルであった。また、肝癌の超音波撮影による腫瘍径と血清活性値の間に相関性がみられたことより、本酵素は癌組織の増殖度を反映しているとみられる。一方、肝癌のAFP産生と本酵素活性を比較すると、AFP産生するものは概ね本酵素活性も高値を示したがAFP非産生肝癌でも高活性を示す例があり、逆にAFPを産生しても低活性を示すなど、AFP産生と本酵素活性には相関性がみられず、互いに独立して肝癌で発現しているとみられる(J.Natl.Cancer Inst.,投稿中)。血清より本酵素を部分生成して性状を調べた結果、組織由来の酵素とは異なり、糖脂質GalCerよりはLacCerを最もよい基質とした。しかし、ゴルジ由来の他の硫酸化酵素に見られる一般的な性質であるNiやZnによる阻害効果は同じであった。膜結合性の本酵素が血清に遊離する機構は明かでないが、培養繊維芽細胞の培地に本酵素活性が観測されることから、正常細胞で存在する遊離機構が癌で増幅されたものと思われる。

多种硫酸化糖脂在肾细胞癌、胃癌、肺腺癌等腺癌组织中显着升高。直接原因是磺基转移酶活性增加，从而使糖脂硫酸化。这种现象在肾细胞癌中最为明显。我们检查了这种组织水平的生化特征是否反映在血清中，以及是否对肾细胞癌的血清诊断有效，肾细胞癌没有特别有效的肿瘤标志物。我们还研究了其他癌症血清并进一步分析了这种酶的生化特性。以前，使用复杂的方法来测量糖脂硫酸酯酶的活性，但我们开发了一种更简单、更快速的改进方法（Anal.Biochem.，1989）。然而，由于该酶的产物硫酸糖脂与血清蛋白结合，因此我们进一步改进了测量血清酶活性的改进方法。结果，与健康个体的血清相比，肾细胞癌中的活性显着增加，而其他实体瘤、胃癌、肺癌、结直肠癌、膀胱癌、子宫癌和其他实体瘤的血清中的活性处于正常水平。宫颈癌（Eur. J. Biochem，1990，印刷中）。然而，肝细胞癌的价值高于肾细胞癌。除肝癌以外的肝脏疾病的血清样本显示肝硬化和肝炎的水平正常。此外，由于观察到通过肝癌超声成像测量的肿瘤直径与血清活性值之间存在相关性，因此该酶似乎反映了癌组织的增殖程度。另一方面，当我们比较肝癌中AFP的产生和这种酶的活性时，我们发现那些产生AFP的肝癌通常具有较高水平的这种酶活性，但也有一些不产生AFP的肝癌表现出高水平的这种酶活性。 AFP 的产生与该酶活性之间没有相关性，例如低活性，并且它们似乎在肝癌中独立表达（J. Natl. Cancer Inst.，正在进行中）。通过从血清中部分生产这种酶并研究其特性，我们发现 LacCer 是最好的底物，而不是糖脂 GalCer，这与组织来源的酶不同。然而，在其他高尔基体衍生的硫酸化酶中发现的常见特性镍和锌的抑制作用是相同的。尽管这种膜结合酶释放到血清中的机制尚不清楚，但在培养的成纤维细胞的培养基中观察到的酶活性表明，正常细胞中存在的释放机制在癌症中会被放大。