家族性大腸腺腫症の遺伝学的解析

家族性腺瘤性息肉病的遗传分析

基本信息

批准号：
61010033
负责人：
外村晶
金额：
$ 5.82万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1986
资助国家：
日本
起止时间：
1986 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61010033/
关键词：
家族性大腸ポリポージス染色体異常 HLAタイピング c-sis cDNAクローン

项目摘要

本年度は家族性大腸ポリポージス(FPC)17家系の71名から末梢血を採取し、班員に分与した。そのうち、EBウイルス媒介により53例のリンパ芽球細胞株を樹立し、残りは現在樹立中である。また、6検体から大腸ポリープまたは大腸癌が得られ、関係班員に配分した。染色体分析の可能であったのは4例で、そのうちの2例は術後の腫瘍組織とヌードマウス可移植株の両方で分析することができた。3例は近2倍性で1例は4倍性を示し、これらの腫瘍に特異的な染色体異常を発見すべく検索中である。各種の血液多型性形質を指標とした連鎖分析は引き続き継続中であるが、66家系182名の家系構成員と正常対照者108名について行ったHLAタイピングの結果、FPCとHLAとの連鎖関係は認められないことがほぼ確実視されるに至ったので、今後は、第6染色体の短腕に存在するHLA遺伝子群以外の領域に対する検索をRFLPs等を用いて進めることとした。一方、12種類のRFLPsを検出できるプローブを用いた連鎖検定の結果、Lod scoreを算出するための必要條件を満したのは3プローブであったが、検定数が2家系だけで有意な結論は得られていない。次に、RFLPsを示す癌遺伝子C-H-ras,C-K-ras,c-sis,c-fms,c-mybについて、癌組織、ポリープ、デスモイドからDNAを抽出してサザンブロット法を行い、同一患者の正常部位から得られるRFLPsのパターンと比較した。その結果、FPC患者の癌の1例でc-sisのホモ接合化を発見した。正常組織ではヘテロ接合であったので、22番目の染色体の一方の消失が示唆され、癌細胞の染色体分析を行ったところ、22番目の一方が消失しており、ヘミ接合化していることが判明した。他の患者ではこのような変化は認められず、さらに検索が必要である。そのほか、ポリープで発現の高いcDNAクローンを得るために、ポリープのcDNAライブラリーについてスクリーニングを行っている。

今年，我们从 17 个家族性大肠杆菌 (FPC) 家族的 71 名个体中采集了外周血，并分发给团队成员。其中，53个类淋巴母细胞系是利用EB病毒建立的，其余细胞系目前正在建立中。此外，还从六个标本中获取了结肠息肉或结肠癌，并分发给相关团队成员。 4例可进行染色体分析，2例术后肿瘤组织及可移植裸鼠品系均可分析。三例显示近二倍体，一例显示四倍体，我们目前正在寻找这些肿瘤特有的染色体异常。尽管以各种血液多态性状为指标的连锁分析仍在进行中，但对66个家族的182名家庭成员和108名正常对照进行的HLA分型结果揭示了FPC和HLA之间的连锁关系，因为几乎可以肯定这不是连锁关系。观察到，我们决定继续使用 RFLP 来搜索 6 号染色体短臂上存在的 HLA 基因组以外的区域。另一方面，使用能够检测12种RFLP的探针进行连锁测试，结果有3个探针满足计算Lod分数的必要条件，但测试的家族数量只有2个，因此无法得出有意义的结论。未绘制。接下来，对于表现出RFLP的癌基因C-H-ras、C-K-ras、c-sis、c-fms和c-myb，从癌组织、息肉和硬纤维中提取DNA，并进行Southern印迹分析。比较从正常位点获得的 RFLP。结果，我们在一名 FPC 患者的癌症病例中发现了 c-sis 纯合性。由于在正常组织中是杂合的，因此表明第22条染色体中的一条丢失了，而当对癌细胞进行染色体分析时，发现第22条染色体中的一条丢失了，使其成为半合子。。在其他患者中未观察到这些变化，需要进一步研究。此外，正在筛选息肉cDNA文库以获得在息肉中高表达的cDNA克隆。