家族性大腸ポリポージスにおける発癌機構の解析

家族性结直肠息肉病致癌机制分析

基本信息

批准号：
01010022
负责人：
外村晶
金额：
$ 5.76万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1)家族性大腸ポリポージス(以下FPCと略す)患者より得たポリープおよび大腸癌の短期培養が完全に成功するようになり、短期培養細胞の染色体分析を行った。大腸癌では5gのほか17p、18および22番染色体の消失、ポリープでは7、12、13および20番染色体のトリソミーと10と22番染色体の消失が比較的高頻度で起こっていることが判明した。また構造異常としては1p、5q、10q、17pの欠失が特異的であった。2)同様の現象は多型性DNAプローブを用いた特定遺伝子のヘテロ接合型消失の研究によっても裏付けられ、大腸癌では5q21ーq22、17p12ーp13および18q21ーqterにおけるヘテロ接合型の消失が35%から70%以上に生じていることが明らかにされた。現在までの結果を総合すると、FPC遺伝子のヘテロ接合型の消失、高異型性ポリープにおけるKras遺伝子の活性化、17pの欠失による癌化への転換、18、22qの欠失による癌の進行、さらに付加的染色体変異による癌の促進という機序が考えられる。したがって、FPC患者における大腸癌の発生には、網膜芽細胞腫にみられるような単一の癌抑性遺伝子の消失とは異なり、ポリープ発生から癌化、への進行過程において複数の癌抑制遺伝子の消失が必要であることが示唆された。3)ヒトの5、17、18番染色体をそれぞれ別々に保有するマウスA9細胞株を用いて、微小核融合法により大腸癌細胞に5番染色体を導入し、ヌードマウスに移植したところ、造腫瘍性の低下が認められた。5番染色体に癌抑制遺伝子の存在することが推測できた。4)ヒトの5番染色体をトランスフェクション法によりDT細胞に導入したところ、Alu陽性のフラットリバータントが得られた。第2回目のトランスフェクションでもAlu陽性のクローンが1個得られたので、現在この遺伝子をクローニング中である。

1）家族性息肉病大肠杆菌（以下简称FPC）患者的息肉和结肠癌短期培养已完全成功，并对短期培养细胞进行了染色体分析。研究发现，结直肠癌中除5g外还存在17p、18和22号染色体缺失，息肉中7、12、13和20号染色体三体性以及10和22号染色体缺失的发生率相对较高。此外，具体的结构异常是 1p、5q、10q 和 17p 的缺失。 2)使用多态性DNA探针对特定基因杂合性丢失的研究也支持了类似的现象，其发生率范围从%到70%以上。结合迄今为止的结果，结果包括FPC基因杂合性的丧失、高度异形性息肉中Kras基因的激活、由于17p缺失而转化为癌症、由于18和22q缺失而导致癌症进展，另一种可能的机制额外的染色体突变会促进癌症的发生。因此，与视网膜母细胞瘤中单个抑癌基因的缺失不同，在FPC患者从息肉发展到癌症的过程中，多个抑癌基因的消失参与了结直肠癌的发生。 3）利用分别携带人类5号、17号、18号染色体的小鼠A9细胞系，通过微核融合方法将5号染色体导入结肠癌细胞中，移植到裸鼠体内时，观察到肿瘤形成和性别减少。观察到。推测5号染色体上存在抑癌基因。 4)通过转染将人5号染色体导入DT细胞，得到Alu阳性的扁平回复体。第二次转染获得1个Alu阳性克隆，目前该基因正在克隆中。