抗赤血球寄生性原虫活性を示すペプタイド治療薬の探索

寻找具有抗红细胞原生动物活性的治疗肽

基本信息

批准号：
15019004
负责人：
横山直明
金额：
$ 2.94万
依托单位：
Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の目的は、各種動物赤血球に吸着活性を示すペプタイド配列の一覧パネルを作製し、赤血球内寄生性原虫の爆発的増殖を阻止できるペプタイド治療薬を探索することであった。成果達成のために、1)各種動物赤血球に高い親和性を示すPeptide display phage(PDF)の精製とそのペプタイド配列の同定、2)吸着が確認された各種PDPによるバベシア原虫の増殖抑制効果の評価、3)抗標的ペプタイド免疫血清と各種原虫由来cDNA expression phage libraryを用いた原虫由来赤血球吸着リガンドのイムノクローニング、4)遺伝子発現産物の赤血球吸着能の検証、5)遺伝子導入組換えバベシア原虫を用いた遺伝子発現産物の機能解析、6)赤血球側受容体の同定を計画した。現在までに、バベシア原虫の感染には赤血球側のシアル酸分子が受容体として重要な働きをしていることを見いだし、PDF libraryよりウシの生赤血球膜上のシアル酸に吸着活性を示すPDP群の精製に成功した。このPDP群はIn vitro培養におけるウシバベシア原虫の増殖を有意に抑制した。さらに、このPDP群を免疫したマウス血清は、バベシア感染血液塗末標本を用いた間接蛍光抗体法により原虫のみを認識することを発見し、かつ本マウス血清を添加した培養液中ではバべシア原虫の増殖が有意に抑えられることを見いだした。現在、このマウス血清とウシバベシア原虫のcDNA expression phage libraryを活用して原虫側のシアル酸認識リガンドを探索しており、この分子相互作用を解き明かすことで有効なペプタイド治療薬の構築が可能となると考えている。

这项研究的目的是创建一个肽序列的列表面板，该小组在各种动物红细胞上表现出吸附活性，并寻找可以防止红细胞中寄生虫原生动物爆炸性生长的肽疗法。为了获得结果，我们计划到1）纯化肽显示噬菌体（PDF），该噬菌体对各种动物红细胞表现出很高的亲和力，并确定其肽序列，2）评估已确认对AdSorb确认的各种PDP的生长抑制作用，3）使用原生动物源自eryternocter protiver dective dredareptive protive dreake prote prote preege preege preege preege preege preeke preege preege preege preege preeg pereptiare pereptient prote preege preege pereptient prote preeptient pereptient。免疫血清和cDNA表达噬菌体文库衍生自各种原生动物，4）验证基因表达产物对吸附的能力，5）使用基因转移的重组Babesia原生动物对基因表达产物的功能分析，而6）识别促成细胞的受体。迄今为止，我们已经发现，红细胞侧的唾液酸分子在感染的受体中起着重要的作用，并且我们成功地纯化了PDP基团，PDP基团在活牛油红细胞膜上表现出对唾液酸的吸附活性。这组PDP显着抑制了牛在体外培养物中原生动物的生长。此外，已经发现，使用该PDP组免疫的小鼠血清仅通过间接荧光免疫荧光使用Babesia感染的血液漆标本识别原生动物，而在补充小鼠血清的培养基中，原生动物原生动物在培养基中得到了显着抑制。当前，我们正在使用小鼠血清和原生动物原生动物的cDNA表达噬菌体库来搜索原生动物侧的唾液酸识别配体，并且我们相信，通过阐明这种分子相互作用，我们将能够构建有效的肽疗法。